rtpcr時提取rna的濃度和純度有什麼要求
1樓：網友
rtpcr時提取rna的濃度和純度要求：濃度20ng/ul以上足夠了，如果用的是組織提取，濃度一般很高，可以達到幾百甚至幾千。如果你用的是病毒、少量細胞，濃度低一些也沒有關係。
純度需要用儀器測一下。260/280理論值應該有以上，260/230值以上基本合格。
rt-pcr：最重要的是rna是否有明顯降解，這個需要跑電泳看。一般來說28s應該比18s亮倍，說明提取得不錯。
反轉錄·聚合酶鏈反應（reverse transcription-polymerase chain reaction, rt-pcr）是將rna的反轉錄（reverse transcription ）和cdna的聚合酶鏈式擴增（pcr）相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從rna合成 cdna，再以cdna為模板，擴增合成目的片段。rt-pcr技術靈敏而且用途廣泛，可用於檢測細胞中基因表達水平，細胞中rna病毒的含量和直接轉殖 特定基因的cdna序列。
作為模板的rna可以是總rna、mrna或體外轉錄的rna產物。無論使用何種rna，關鍵是確保rna中無rna酶和基因組 dna的汙染。
提取組織或細胞中的總rna，以其中的mrna作為模板，採用oligo（dt）或隨機引物利用反轉錄酶反轉錄成cdna。再以cdna為模板經行pcr擴增，而獲得目的基因或檢測基因表達。
2樓：網友
濃度20ng/ul以上足夠了，如果你用的是組織提取，濃度一般很高，可以達到幾百甚至幾千。如果你用的是病毒、少量細胞，濃度低一些也沒有關係。
純度你需要用儀器測一下。260/280理論值應該有以上，260/230值以上基本合格。
最重要的是rna是否有明顯降解，這個你需要跑電泳看。一般來說28s應該比18s亮倍，說明提取得不錯。
如何選擇正確的rna提取方法
3樓：網友
biodai離心法對於拭子的bai處理，向離心du
管中加入800μl生理鹽zhi水dao，將拭子版收集的樣本置於生理鹽水中，涮洗20秒，使細。
權胞完全脫落，貼離心管壁擠幹拭子上的液體，12,000 rpm 離心5 min，棄700 μl上清，剩餘100μl上清，充分振盪混勻15秒。
葉綠體中C3化合物含量為什麼高於C5化合物
若t時刻降低了光照強度，光反應下降，生成atp下降，消耗的adp減少，另一方面，暗反應繼續消耗atp生成adp，故直接引起adp增加，故a代表adp 光反應提供的 h 和atp減少，c還原下降，c積累，另一方面繼續固定co生成c，故間接引起c增碼鉛談加，故b代表c 若t時刻降低了培養液中nahco的...
有什麼食物的鈣含量高
1全部芝麻醬每100克芝麻醬中就有高達1057毫克的鈣質，毫無置疑地比牛奶和蝦皮都高得多，另外，芝麻醬富含蛋白質 氨基酸 多種維生素和礦物質，還有豐富的卵磷脂，可以防止脫髮，保養肌膚，調理腸胃。蝦皮很多人在吃蝦的時候都將蝦皮剝的一乾二淨，但是恰恰富含鈣質的也是蝦皮，100克蝦皮裡面的鈣含量就高達99...
土豆中什麼含量最多
馬鈴薯作物中的抗營養因子是 根莖葉都含有龍葵素 solanen 40 140mg kg，塊根中含有果膠0.58 皮中4.15 另外含有少量胰蛋白酶抑制因子。普通栽培種馬鈴薯由塊莖繁殖生長，形態因品種而異。株高約 50 80 釐米。莖分地上莖和地下莖兩部分。塊莖圓 卵圓或長圓形。薯皮的顏色為白 黃 粉...