凍存組織做western blot可以嗎？需要注意什麼

1樓：網友

可以，沒什麼特別需要注意的，按照正常的流程進行蛋白提取。

2樓：愛我家菜菜

蛋白質印跡法（免疫印跡試驗）即western blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。

通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的資訊。

凍存的標本能不能做western blot，是原代的標本哦，從超低溫冰箱取出來後需要經過什麼處理嗎？

3樓：網友

完全可以的，要迅速解凍，提蛋白，正常處理就可以了。

4樓：網友

能啊研磨之後像提細胞蛋白那樣裂解提蛋白就可以了。

5樓：網友

為什麼不能做呢？你做什麼指標呀，你所做的指標穩定性如何呀？謹慎而大膽去做！

做western blot 需多少心肌組織

6樓：胡大元

做western blot需要多少細胞並不是乙個固定的值這主要取決於蛋白的表達量，沒有乙個絕對的量如果做細胞總蛋白的話，至少10的4次方細胞每微公升蛋白裂解液。一般可以每泳道取10的5次方細胞每微公升蛋白裂解液（即10微公升上樣）

根據這個數量級，結合western blot結果進行調整即可確認做western blot需要多少細胞。

組織能不能混到一起做western

7樓：柏拉圖的海摩羯

western blot 跑膠的條帶擴散混一起原因很多但是可以肯定的是和sds-page的膠或者樣品有關係具體來說，可能是蛋白上樣體積太大，加樣時溢位，可以減少上樣量或者用更厚的膠或者是濃縮膠和分離膠之間有縫隙。

總之要檢查sds-page的過程，就可以解決western blot跑膠的條帶擴散混一起的問題。

對於大分子的蛋白做western blot 有哪些需要注意的

8樓：檢驗教研室

大分子蛋白和小分子蛋白做western blot其實要求是一樣的，區別就在於大分子蛋白跑得慢，所以電泳和轉膜需要的電壓或電流更大，時間更長，當然，一般大分子蛋白需要用低濃度膠，而小分子蛋白則選擇高濃度膠。