1樓：匿名使用者
也可以用，就是濃度略低了點，推薦分離膠的濃度一般是按照要分離的蛋白的分子量範圍決定的，10-80kda的建議14% 20-150kda的建議12% 30-200kda的建議10% 根據這樣的推薦來看，30是分離下限了，所以這個分離膠的濃度略低，可以試試12%或者15%的。
小分子量蛋白該怎麼跑sds-page
2樓：網友
可以適當提高sds-page濃度，或是根據情況縮短電泳的時間。
sds-page上樣量多少合適？ 分子量20kda左右 ，應該用多大濃度的分離膠？15％我試過了，總是跑不開
3樓：網友
請問你的跑不開是怎樣的，我之前做過一次是marker和樣品都只在分離膠的上半部分分開，下半部分完全沒有分開，都看不到marker的條帶。
4樓：伍靈凡
15%的膠應該是沒問題的，跑的時間長一些，距離長一些就能跑開。上樣量得看你蛋白的表達量，一般15-30μg就應該沒有問題，不過選用β-actin做對照，建議用另一塊12%的膠跑β-actin，這樣可以使目的蛋白和對照條頻寬度大概一致。
5樓：網友
可以試一下小分子膠，不過也15%沒有問題。上樣量影響不大，看你的樣品濃度上樣。
6樓：網友
跑不開？考染？ 如果是抗體雜的話不存在跑不開的問題吧 跑的久點。。。或者用大膠跑 如果你們那有人會弄的話。
8kda蛋白在sds-page電泳時分離膠的濃度該選擇多大
7樓：北京索萊寶科技****
聚丙烯醯胺凝膠濃度與蛋白質分離範圍的關係：
聚丙烯醯胺凝膠濃度/% 蛋白質分離範圍/kd
濃縮膠濃度低；分離膠濃度高於濃縮膠，一般不小於5%。
8kd的蛋白質可能就要用tricine–sds-page系統，因為濃縮膠和分離膠濃度太大，電泳速度很忙，很可能引起電泳帶彌散。
sds-page的電壓問題，求教
8樓：網友
兩層膠，也就是濃縮膠和分離膠。
在理論上來說最好是電壓不一樣，濃縮膠小一些一般是50~90v，分離膠大一些一般是120~200v
但是就實際操作來說，如果需要處理大量的sds-page，並不需要嚴格的控制電壓。一般可以200v恆壓直接跑完，實際效果並不會特別差。
跑western時不同濃度的分離膠對跑蛋白的影響
9樓：匿名使用者
如果膠濃度不同，蛋白在其中遷移的速率就不一樣，所以如果採用裁膜的方式，對於蛋白遷移的位置要事先有個預判。10%的膠，濃度高，遷移慢一些，如果都在相同位置裁，這裡看到條帶，6,8%的膠，膜需要裁得更靠下緣。或者把之前裁掉的膜的下半部分再拿來做做實驗試試。
當然，電泳時的各種因素也會有影響，但是如果其他配置完全一樣，就是膠濃度變化了的話，上述原因是需要考慮的。
sds-page蛋白電泳配膠不凝固
10樓：網友
我分析原因是過硫酸胺失效，過硫酸氨最好是先用現配，如果怕麻煩而且跑膠的頻率很高的話，那麼用完之後ap要放在4℃儲存，一週之後必須新配。另外可以適當的增加temed的量，從5μl提高到8μl並無大礙。
如你所說，是不是就是ap失效呢，還有，我強烈建議你複查一邊濃縮膠，分離膠各各buffer的組分是否配製有誤，特別是ph，另外，現在氣溫上公升，原來冬天配製的溶液的ph和現在可能會相差很多，建議複查，如果ph不對，重新配過。一般情況下，對於ph有要求的溶液，季節更換的時候，基本要重新配過的。原來以貯存液形式存在的溶液，在稀釋用作工作液的時候，也要特別注意ph
11樓：***
分離膠30分鐘左右凝固有點慢，可能ap配製時間過長。多加點試試。
12樓：網友
1，多加過硫酸銨試試。
2，多加點temed，可加速凝固。
3，配好膠後放在溫箱裡凝的快些，環境溫度低會影響凝的速度。我在冬天會灌好膠後放在培養箱裡，一般很快就凝了，可以提高效率，一天最多可以跑5次。
最後，經常出現濃縮膠凝但不成形，非常粘，這是因為c液（濃縮膠緩衝液）的ph值不對，重新配製c液。
做了四年蛋白電泳實驗，不凝是是最初發生的問題，基本按以上思路解決的，以後再沒遇見過，但也不排除我能力範圍之外的沒想到的因素。
13樓：網友
過硫酸氨最好現配，4度儲存最多7天。
14樓：吉念桃
這麼專業的問題在這裡問，你肯定是得不到答案的，查專業書靠得住些。
15樓：曾
多加temed是正確的。
加標準值的兩倍。
小分子蛋白用20%分離膠可以跑出來嗎
16樓：匿名使用者
膠濃度與蛋白大小，是經過前人多次電泳的經驗總結。在最佳的電泳條件下，能得到比較好的分離效果和比較好看的條帶。
如果膠濃度夠大，蛋白條帶會比較細一些，但電泳速度比較慢，大的片段可能分不開。
10%能不能用得看你的情況了。如果只是乙個條帶，用10%是沒有問題的。如果有些雜帶，而且雜帶與你的目標蛋白差得比較遠，也是可以用的。
如果差別小，那就得用濃度低一點的膠了，這樣才能分開。
凝膠過濾和sds-page這兩種分離蛋白質的方法均建築在分子大小的基礎上，為什麼
17樓：小小微生物
凝膠過濾，分子小的先流穿，分子大的被截留。
sds-page，分子小的跑的快，分子大的跑的慢。
都是 通過分子大小來達到分離效果的。
蛋白質中的蛋白質分子能透過濾紙,但不能透過半透膜對嗎
對，正像上面所些的，直徑小於奈米的分子才可過。半透膜。灶搏敗蛋白質分子較大不能過膜。人的銀高細胞膜。也是半透膜，蛋白質分子過膜是靠內吞和外排進出細胞的。細胞膜主要是由磷脂。分子構成。把磷脂分子們想象成緊挨著又不斷運動的。小皮球。蛋白質分子從細胞外面來了，這些小球向裡凹形成小坑，蛋白質分子進去後兩邊小...
人每天蛋白質最大攝入量，蛋白質每天的攝入量該是多少
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膠原蛋白的分子量多少是最好的？
科學研究表明，豬蹄扮敏 魚皮巧孝等食物中含有的是大分子膠原蛋白，百福美膠原蛋白的分子量為道爾頓左右。分子量過大，膠原蛋白生物利用度就會明顯降孝缺稿低 分子量過小，膠原蛋白結構容易分解，肽鏈穩定性差，膠原蛋白易變質而產生 經科學驗證，分子量在道爾頓左右的膠原蛋白最容易被人體吸收，同時又有良好的穩定性，...