如何點評RNA跑膠圖,提取的總RNA跑膠從大到小有幾條帶

2022-11-26 02:26:00 字數 2497 閱讀 6708

1樓:糟油酒丸

提取完了用分光光度計能夠測定濃度,跑膠主要看兩個條帶(18s,28s)都在,彌散多不多,從而判斷rna分子完整性。

核糖體rna(ribosomal rna,rrna)是組成核糖體的主要成分。核糖體是合成蛋白質的工廠。在大腸桿菌中,rrna量佔細胞總rna量的75%-85%,而trna佔15%,mrna僅佔3-5%。

rrna一般與核糖體蛋白質結合在一起,形成核糖體(ribosome),如果把rrna從核糖體上除掉,核糖體的結構就會發生塌陷。原核生物的核糖體所含的rrna有5s、16s及23s三種。s為沉降係數(sedimentation coefficient),當用超速離心測定一個粒子的沉澱速度時,此速度與粒子的大小直徑成比例。

5s含有120個核苷酸,16s含有1540個核苷酸,而23s含有2900個核苷酸。而真核生物有4種rrna,它們分子大小分別是5s、5.8s、18s和28s,分別具有大約120、160、 1900和4700個核苷酸。

rna樣品電泳後,可見28s、18s及5s小分子rna條帶,則說明完整性好。若有降解可能是操作不當或汙染了rnase.。28s和18s rna比值約為2:

1,表明rna無降解。如比值逆轉,則表明rna降解。

2樓:

rna略有降解,做rt沒問題,跑膠也還可以,上樣量大了,兩三ul就可以了,條帶變拱形是你加樣是粘在壁上造成的,下次加樣插的深點。

一般都是1%的eb膠,180v電泳10-15min,膠,電泳緩衝液都是新配的,然後馬上拍照。

上樣量一般1-2ul,太多了容易造成判斷不準,你還是重新跑一個電泳再繼續做。因為在降解時18和28s條帶會變弱,5s條帶會變亮。

你的電泳效果看起來一般,如果真的是這樣,估計rt勉強可以用,但是效果不是很好。如果擴增長片段或者表達量低的基因估計有些危險。

提取的總rna跑膠從大到小有幾條帶

3樓:變美的果團

提取的總rna跑膠從大到小有帶3條。三條是主帶。

哺乳動物的rna包括mrna,rrna,trna和du小rna,根據分子量和沉降係數的不同,rrna又可分為28s, 18s 和5.8s 的rrna。從rna的含量上看,rrna是幾種rna中最多的,高達90%以上,而mrna很少,只有1-2%,而其他兩種rna的分子量比較小,這就解釋了為什麼從凝膠電泳的結果上只能看到三條帶。

而這三條帶的完整性,就代表了mrna的完整性。

4樓:北京索萊寶科技****

5s,18s,28s,

5s應該最暗,28s應該最亮。。

和dna maker 比較的話,28s大概在5k左右,18s大概在3k左右,5.8s和5s是用瓊脂糖是分開不了的,只是一條很弱的條帶,在100bp左右,好的rna要求28s亮度是18s的兩倍,

5樓:匿名使用者

常見的有三個條帶,分別對應核糖體rna的28s,18s和5s條帶。

rna提取測的值挺好的,為什麼跑膠跑成這樣

6樓:匿名使用者

你的膠圖沒有,是不是彌散的條帶,有可能是被rna酶消化了,導致拖帶,注意使用的離心管,槍頭進行滅菌,紫外照射等,儘量使用depc水,還有電泳的東西也注意用紫外或者是depc處理浸泡等,去除酶

做轉錄組的rna需要跑膠檢測嗎

7樓:匿名使用者

做轉錄組的bai兩者是

同一個概念。

轉錄du組測序亦稱rna-seq(rna sequencing),是zhi指利用第二代dao

高通量測序技術進行專cdna測序,全面快速地獲屬取某一物種特定器官或組織在某一狀態下的幾乎所有轉錄本。

相對於傳統晶片而言,轉錄組測序無需預先設計探針,即可對任意物種的任意細胞型別的轉錄組進行檢測,能夠提供更精確的數字化訊號,更高的檢測通量以及更廣泛的檢測範圍,是目前深入研究轉錄組複雜性的強大工具。

提取rna,用水溶解後跑膠,跑膠這段時間rna要儲存在那裡啊,

8樓:

幾個小時放在冰上沒問題!我現在正在做這個! 如果你當天還要用rna做下一步試驗的話就別凍起來,凍融迴圈也會導致其少量降解,如果下一步提取mrna的話直接用是最好的啦!

9樓:

20分鐘的話放冰上就可以了 好幾天的話就得放-80了

10樓:匿名使用者

如果是純化完成後立即跑膠檢測的話,放置在冰上就可以了,但是要注意放置樣品的實驗器具是需要depc處理過的,且在放置的過程需是密閉的。

雙鏈rna用什麼膠跑電泳,跑出來的圖是什麼樣的

11樓:半根兒煙的

用瓊脂糖凝膠就行,用tae電泳緩衝液,應該是三條帶,或者是抹帶。

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