1樓：灰原哀
可以使用primer5 或者primerdesign設計 還是主要考慮髮夾結構，gc含量，tm值和引物交叉，還有減少引物二聚體的產生。
如果是擴增啟動子的話，建議選擇引物的長度30-35bp，一般試劑盒裡有接頭引物的，只要在下游已知序列設計引物就可以咯
2樓：
巢式pcr（nested pcr），是指利用兩套pcr引物（巢式引物）對進行兩輪pcr擴增反應。
在第一輪擴增中，外引物用以產生擴增產物，此產物在在內引物的存在下進行第二輪擴增。
由於巢式pcr反應有兩次pcr擴增，從而降低了擴增多個靶位點的可能性（因為與兩套引物都互補的引物很少）增加了檢測的敏感性；又有兩對pcr引物與檢測模板的配對，增加了檢測的可靠性。
一般應用於動物方面。如：病毒，梅毒螺旋體，hiv，腫瘤基因等
巢式pcr，可以在10的六次方基因組背景下檢測到一個拷貝的病毒基因，也不像二次pcr容易產生成片的產物，是效果最好的pcr，但也因此是最容易汙染的pcr
3樓：糟油酒丸
看了下一樓的.外引物的設計似乎跟普通pcr沒有不同。但是為了確保外引物的擴增子內部有合適的位點給內引物，貌似還是先設計內引物較為恰當。
為什麼設計pcr引物時，後面那條引物設計出來後要反轉？
4樓：匿名使用者
兩條引物針對兩條鏈設計，因為擴增的方向都是5『-3』。每條引物針對一條鏈，這樣整個pcr反應就兩條鏈都合成出來了。所以設計的時候，第二條引物是用互補鏈為模板設計的，所以要反轉。
用引物設計軟體設計，很容易就搞清楚原理了，也不容易出錯。
pcr的技術的主要步驟及pcr引物設計的一般原則有哪些
什麼叫巢式pcr
5樓：南京金益柏生物科技****
就是多重pcr,第一次獲得產物濃度不夠,但迴圈數過多會造成產物質量不好,就會以第一次pcr產物為模板,設計內引物進行第二次擴增,獲得高質量產物
6樓：
巢式pcr是一種變異的聚合酶鏈反應(pcr)，使用兩對（而非一對）pcr引物擴增完整的片段。第一對pcr引物擴增片段和普通pcr相似。第二對引物稱為巢式引物（因為他們在第一次pcr擴增片段的內部）結合在第一次pcr產物內部，使得第二次pcr擴增片段短於第一次擴增。
巢式pcr的好處在於，如果第一次擴增產生了錯誤片斷，則第二次能在錯誤片段上進行引物配對並擴增的概率極低。因此，巢式pcr的擴增非常特異。
7樓：匿名使用者
形象點兒說就像鳥巢，兩對兒引物，一對擴長片段，一對兒設計在長片段內，這樣做的好處是，提高擴增效率和特異性
8樓：百替生物
巢式pcr（nest pcr），使用兩對引物對目的基因進行擴增的一種pcr技術。首先在該基因起始密碼子上游數百bp和終止密碼子下游數百bp位置設定一對引物，這對引物由於可操控性大，可以將tm值，引物結構等設定到最佳。或者可以通過軟體自動分析，由機器給出引物序列。
然後再在目的基因的準確位置設計第二對引物。
在進行pcr時，先用第一對引物進行擴增，擴增後跑膠檢測，如果此時跑膠已經可以檢測出較好的條帶，可以進行**純化，再將**產物作為模板，用第二對引物進行第二輪擴增。如果第一輪產物跑膠時看不清楚條帶，則可以將產物適當稀釋，以此作為第二輪的模板進行擴增，一般在第一輪以低拷貝量存在的dna通過第二輪的擴增都可以成功獲得的。祝你成功。
想要獲得基因克隆，真核或者原核表達載體的話，我們百替生物也可以提供此類服務！公司
如何設計熒光定量pcr的引物及taqman探針
用專門的試劑盒來做吧，然後按照說明書操作，挺方便的。我們實驗室以前用的biog熒光定量pcr試劑盒，反應挺靈敏的，實驗結果也不錯，而且染料法和探針法都有。可以用引物設計軟體，primer5就挺不錯的。你是要檢測dna還是rna？探針法檢測dna的話可以用biog super probe kit，檢測...
設計一對合適引物,用以擴增乙醛脫氫酶
關鍵是要看你擴的片段有多長？一般擴的話用一對引物可以擴出1k多的片段。而用一個引物去測序的話一次只能測出600 700左右，而如果你擴的片段較長的話只用一條引物就沒法測通，可能就需要一對或者是更多的引物去測序了！兩對引物擴增？lz說的什麼意思？擴增後怎麼拼接呀？又沒有序列！一般擴增用一對引物就行了，...
幫我設計個承諾約定的情侶網名，幫我設計一對情侶網名，謝謝了
承諾 約啶 情侶網名凸顯約定和承諾的有 第一組 260 約定此刻 260 承諾今生 260 260 520 我愛你，同時也有你是我的另一半的意思。第二組 我 約定 lo ve 承諾 你 這兩個名字可以連起來 我 約定 love 承諾 你意思為 我約定愛你 你承諾愛我 第三組 承諾 今生世 約定 不離...