原位雜交技術和免疫細胞化學技術的聯絡與區別

2021-04-17 22:18:26 字數 3695 閱讀 3343

1樓:匿名使用者

原位雜交技術的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的鹼基序列,將有放射性或非放專射性的外源屬核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測dna或rna互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。

免疫細胞化學是用標記的特異性抗體(或抗原)對組織內抗原(或抗體)的分佈進行組織和細胞原位檢測技術。

一個是用核酸序列檢測,一個使用抗體或抗原檢測它們都可以定位

免疫組化和原位雜交的區別

2樓:淵源

免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術。

原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行精確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行。

原位雜交技術的原位雜交的基本原理

3樓:哈比

原位雜交技術的基本原理是利用

核酸分子單鏈之間有互補的鹼基序列,將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測dna或rna互補配對,結合成專一的核酸雜交分子,經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件:組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物(曾呈奎等2000) 。

rna原位核酸雜交又稱rna原位雜交組織化學或rna原位雜交。該技術是指運用crna或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內rna表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:

在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的rna核苷酸片段,按核酸雜交中鹼基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體 (hybrids)經顯色反應後在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mrna、rrna和trna分子。rna原位雜交技術 經不斷改進,其應用的領域已遠超出dna原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為最有效的分子病理學技術,同時在分析低丰度和罕見的mrna表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。

原位雜交技術的介紹

4樓:【爆

來(in situ hybridization,ish)是分子生物自學、組織化學及細胞學相結合而產生的一門新興技術,始於20世紀60年代。2023年美國耶魯大學的gall等(1969)首先用爪蟾核糖體基因探針與其卵母細胞雜交,將該基因進行定位,與此同時buongiorno—nardelli和amaldi等(1970)相繼利用同位素標記核酸探針進行了細胞或組織的基因定位,從而創造了原位雜交技術。自此以後,由於分子生物學技術的迅猛發展,特別是20世紀70年代末到80年代初,分子克隆、質粒和噬菌體dna的構建成功,為原位雜交技術的發展奠定了深厚的技術基礎。

免疫組化和原位雜交的區別

5樓:北京索萊寶科技****

原位雜交是基

於核酸水平,免疫組化是基於蛋白水平,互不干擾,

免疫組化和原位雜交組織化學的關鍵技術在**?

6樓:匿名使用者

原位雜交組織

化學(抄

baiin situ hybridization histochemistry, ishh)是應用已知鹼基順序並du帶有標記物的核酸探針與組織、細zhi胞中dao待測的核酸按

鹼基互補配對的原則進行特異性結合,形成雜交體,然後再應用與標記物相應的檢測系統,通過組織化學或免疫組織化學方法在核酸原有的位置進行細胞定位。

免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術

胚胎原位雜交技術與northern blot有什麼相同點和不同點

7樓:熱心網友

blot analysis是一系列的分子生物學的方法。其中northern研究的是rna,southern研究的是dna,western研究的是蛋白。除了southern blot是根據發明者命名的之外,其他的都是根據southern衍生出來的,算是一種約定俗稱的叫法吧,沒什麼特殊的意義。

熒光原位雜交技術的原理

8樓:匿名使用者

熒光,又作「螢光」,是指一種光致發光的冷發光現象。當某種常溫物質經某種波長的入射光(通常是紫外線或x射線)照射,吸收光能後進入激發態,並且立即退激發併發出比入射光的的波長長的出射光(通常波長在可見光波段);而且一旦停止入射光,發光現象也隨之立即消失。具有這種性質的出射光就被稱之為熒光。

在日常生活中,人們通常廣義地把各種微弱的光亮都稱為熒光,而不去仔細追究和區分其發光原理。利用熒光染料與被研究物件(蛋白、多肽等)吸附或共價結合後其熒光特性發生改變,從而反映有關研究物件效能的資訊。

熒游標記染色體的基本原理是通過標記的dna探針與細胞核內的dna靶序列雜交,獲得細胞內多條染色體(或染色體片段)或多種基因狀態的資訊。

用已知的熒光素標記單鏈核酸為探針,按照鹼基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行特異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由於dna分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列,因而可以探針直接與染色體進行雜交從而將特定的基因在染色體上定位。

熒光原位雜交與免疫熒光有什麼區別

9樓:北京索萊寶科技****

熒光原位雜交與免疫熒光的區別:原位雜交是從分子水平檢測,免疫熒光是從蛋白水平檢測。

免疫熒光是利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪製方法,使用熒光素標記探針,以檢測探針和**中期的染色體或**間期的染色質的雜交。

熒光原位雜交的原理:fish(fluorescence in situ hybridization)技術是一種重要的非放射性原位雜交技術。它的基本原理是:

如果被檢測的染色體或dna纖維切片上的靶dna與所用的核酸探針是同源互補的,二者經變性-退火-復性,即可形成靶dna與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標記上報告分子如生物素、地高辛,可利用該報告分。

免疫熒光的原理:免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由於抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。

免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合後,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。

10樓:華全動力集團

熒光原位雜交

熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪製方法,使用熒光素標記探針,以檢測探針和**中期的染色體或**間期的染色質的雜交。

免疫熒光

熒光抗體法。是一種將抗原、抗體的結合反應與形態學相結合的方法。該法把血清學的特異性、熒光色素的敏感性、顯微鏡檢查法集為一體,擴大了免疫學診斷的效果,是近代免疫學的一種重要研究手段。

抗體球蛋白標記上熒光色素,即成為熒光抗體。

原位雜交技術的介紹,原位雜交技術的原位雜交的基本原理

來 in situ hybridization,ish 是分子生物自學 組織化學及細胞學相結合而產生的一門新興技術,始於20世紀60年代。1969年美國耶魯大學的gall等 1969 首先用爪蟾核糖體基因探針與其卵母細胞雜交,將該基因進行定位,與此同時buongiorno nardelli和amal...

熒光原位雜交與免疫熒光有什麼區別

熒光原位雜交與免疫熒光的區別 原位雜交是從分子水平檢測,免疫熒光是從蛋白水平檢測。免疫熒光是利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。熒光原位雜交方法是一種物理圖譜繪製方法,使用熒光素標記探針,以檢測探針和 中期的染色體或 間期的染色質的雜交。熒光原位雜交的原理 fish fluorescen...

植物體細胞雜交技術與動物細胞融合技術有什麼不同

植物體細bai 胞雜交要首先去du掉細胞壁,而動物細胞zhi不用植物dao細胞沒有用胰蛋白酶,回而動物細胞要用胰蛋答白酶植物細胞有再生細胞壁過程,動物細胞沒有 植物細胞融合誘導方法有物理和化學方法 而動物細胞誘導融合有物理化學和生物方法 植物體細胞雜交能最後形成個體,而動物細胞融合能形成細胞系,並不...