1樓:匿名使用者
pcr是現在實驗室常用復的技術手段之一制。一般用bai於病原的檢測,分子du機制中各基因的檢zhi測以及遺傳相關的檢dao測。
感染性疾病
pcr在醫學檢驗學中最有價值的應用領域就是對感染性疾病的診斷。理論上,只要樣本有一個病原體存在,pcr就可以檢測到。一般實驗室也能檢出10~100基因拷貝,而目前病原體抗原檢測方法一般需要105-7個病原體才可檢測到。
pcr對病原體的檢測解決了免疫學檢測的「視窗期」問題,可判斷疾病是否處於隱性或亞臨床狀態。
定量pcr研究資料已表明,病原體數量與感染性疾病病情的輕重程度、傳染性及**效果均有相關性。許多研究表明,人類免疫缺陷病毒(hiv)感染後,潛伏期長短和臨床症狀輕重與血液中的病毒量顯著相關;也有研究表明,hiv病毒載量低於一定值時,沒有傳染性。
在乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒定量研究中發現,病毒的數量與某些藥物的療效相關。例如,干擾素**對肝炎病毒高拷貝者不敏感,低拷貝者敏感;而有些藥物則具有顯著降低病毒高拷貝的作用。
乙肝病毒hbv—dna定量 檢測方法,實時熒光定量pcr 結果7.82e+02 最低檢測下限5.00e+2 這是什麼意思??
2樓:匿名使用者
乙肝病毒dna的檢查,是檢查乙肝病毒在你體內的複製狀態的,7.82e+02是7.82乘以10的2次方,即782copy;相專應的最低檢測下限5.
00e+2是500copy,最屬低檢測下限是檢查的儀器能夠檢查出的最低的病毒複製的copy數,不能說病毒含量低於500就是陰性的,只能說儀器只能檢查到這個程度,而你的病毒含量782略高於最低檢測下限500,說明你體內的病毒複製是一個低水平的複製,傳染性較低。
3樓:匿名使用者
你的結果7.82e+02是7.82乘以10的2次方,即782;相應的最低檢測下限5.
00e+2是500,也就是說,病毒版含量低於權500是陰性的,而你的病毒含量782略高於最低檢測下限500,是弱陽性的。
乙肝病毒dna檢測,熒光定量pcr檢測 1.92e2 ^ 檢測下限~100,是什麼意思?能幫忙解釋
4樓:南寧友愛肝病
你的hbv-dna檢查數值為192大於檢查下限100,是具有傳染性的。肝功能和b超同時也要定期檢查來了解自身狀況。
pcr檢查是什麼
5樓:匿名使用者
聚合酶鏈式反應,簡稱pcr。其英文polymease chain reaction(pcr)是體外酶促合成特異dn**段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應組成一個週期,迴圈進行,使目的dna得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。它不僅可用於基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用於疾病病的診斷或任何有 dna,rna的地方.聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction,簡稱pcr)又稱無細胞分子克隆或特異性dna序列體外引物定向酶促擴增技術。
由美國科學家pe(perkin elmer珀金-埃爾默)公司遺傳部的dr. mullis發明,由於pcrpcr技術在理論和應用上的跨時代意義,因此mullis獲得了2023年諾貝爾化學獎。
dna的半保留複製是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈dna在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在dna聚合酶與啟動子的參與下,根據鹼基互補配對原則複製成同樣的兩分子挎貝。在實驗中發現,dna在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低後又可以復性成為雙鏈。
因此,通過溫度變化控制dna的變性和復性,並設計引物做啟動子,加入dna聚合酶、dntp就可以完成特定基因的體外複製
簡略點,就是運用專門儀器,使用dntps、mg2+、特異引物、dna聚合酶以及緩衝體系,加入模板也就是dna樣品進行體外擴增,結果進行電泳,如果能擴增出,並且擴增的產物大小與目的條帶一致,那說明引物與模板特異,檢測指標就是陽性。
6樓:匿名使用者
是模擬體內dna的天然複製過程,在體外擴增dna分子的一種分子生物學技術,主要用於擴增位於兩段已知序列之間的dna區段。在待擴增的dn**段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物,經變性、退火和延伸若干個迴圈後,dna擴增2n倍,我們現在主要採用bioghc染料法熒光定量pcr和bioghsc探針法熒光定量pcr
7樓:匿名使用者
pcr檢查採用聚合酶鏈反應來進行乙肝病毒檢測,同傳統的乙肝五項檢查相比,pcr檢查的準確性和靈敏度更高
8樓:屠新曾芷文
pcr用於dna複製
你問的應該是spy-pcr檢查
這是檢查性別的
只有y染色體上有spy
什麼是pcr?
9樓:鬆恭載琬
pcr(polymerase
chain
reaction
)即聚合酶鏈式反應
pcr技術的基本原理:該技術是在模板dna、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下,依賴於dna聚合酶的酶促合成反應。dna聚合酶以單鏈dna為模板,藉助一小段雙鏈dna來啟動合成,通過一個或兩個人工合成的寡核苷酸引物與單鏈dna模板中的一段互補序列結合,形成部分雙鏈。
在適宜的溫度和環境下,dna聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物3 ́-oh末端,並以此為起始點,沿模板5 ́→3 ́方向延伸,合成一條新的dna互補鏈。
pcr反應的基本成分包括:模板dna(待擴增dna)、引物、4種脫氧核苷酸(dntps)、dna聚合酶和適宜的緩衝液。類似於dna的天然複製過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。
pcr由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:1模板dna的高溫變性:模板dna經加熱至93°C左右一定時間後,使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;2模板dna與引物的低溫退火(復性):
模板dna經加熱變性成單鏈後,溫度降至55°C左右,引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合;3引物的適溫延伸:dna模板--引物結合物在taqdna聚合酶的作用下,以dntp為反應原料,靶序列為模板,按鹼基配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板dna
鏈互補的半保留複製鏈重複迴圈變性-退火-延伸三過程,就可獲得更多的「半保留複製鏈」,而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。每完成一個迴圈需2~4分鐘,
2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
10樓:柚夏
pcr是聚合酶鏈式(polymerase chain reaction)反應的簡稱,是一種將幾個或幾十個拷貝數dn**段擴增至上百萬份拷貝的方法,這是迄今為止最為重要的技術之一。pcr技術的影響不僅僅侷限於生物科學領域,幾乎人人都可以感受到pcr所帶來的改變,在親子鑑定以及犯罪調查中pcr技術便有廣泛應用。
pcr可以被認為是與發生在細胞內的dna複製過程相似的技術,其結果都是以原來的dna為模板產生新的互補dn**段。細胞中dna的複製是一個非常複雜的過程。參與複製的有多種因素。
pcr是在試管中進行的dna複製反應,基本原理與細胞內dna複製相似,但反應體系相對較簡單。
pcr由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:
1模板dna的變性:模板dna經加熱至94°C左右一定時間後,使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應做準備;
2模板dna與引物的退火(復性):模板dna經加熱變性成單鏈後,溫度降至55°C左右,引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合;
3引物的延伸:dna模板--引物結合物在taq酶的作用下,以dntp為反應原料,靶序列為模板,按鹼基配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板dna 鏈互補的半保留複製鏈。
重複迴圈變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的「半保留複製鏈」,而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。每完成一個迴圈需2~4分鐘, 2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
參考資料
pcr技術原理.丁香通[引用時間2018-5-11]
11樓:春玉英進婷
pcr是聚合酶鏈式反應。這個反應的發生需要目標dna,也需要聚合酶(要不怎麼叫聚合酶鏈式反應呢?)還有4種脫氧核苷酸a、g、c、t。
(注意,a、g、c、t是他們的鹼基,在一定情況下也能指代核糖核苷酸核苷酸或脫氧核苷酸。)
我估計能問這個問題的人不是個初學者就是個高深莫測的人......
12樓:自由之聲了
是手遊princess connect!re dive(公主連結r)的簡稱
13樓:匿名使用者
聚合酶鏈鎖反應,polymerase chain reaction,簡稱pcr,是一種分子生物學技術,用於放大特定的dn**段。可看作生物體外的特殊dna複製。
※pcr基本原理
pcr技術的基本原理類似於dna的天然複製過程,其特異性依賴於與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。pcr由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:
1模板dna的變性:模板dna經加熱至93°C左右一定時間後,使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;
2模板dna與引物的退火(復性):模板dna經加熱變性成單鏈後,溫度降至55°C左右,引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合;
3引物的延伸:dna模板--引物結合物在taqdna聚合酶的作用下,以dntp為反應原料,靶序列為模板,按鹼基配對與半保留複製原理,合成一條新的與模板dna 鏈互補的半保留複製鏈重複迴圈變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的「半保留複製鏈」,而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。每完成一個迴圈需 2~4分鐘, 2~3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
到達平臺期所需迴圈次數取決於樣品中模板的拷貝。
※pcr反應特點
特異性強
pcr反應的特異性決定因素為:
1引物與模板dna特異正確的結合;
2鹼基配對原則;
3taq dna聚合酶合成反應的忠實性;
4靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循鹼基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及taq dna聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。
再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
靈敏度高
pcr產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10- 12)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=-6)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,pcr的靈敏度可達3個rfu(空斑形成單位);在細菌學中最小檢出率為3個細菌。
簡便、快速
pcr反應用耐高溫的taq dna聚合酶,一次性地將反應液加好後,即在dna擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性汙染、易推廣。
對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,dna 粗製品及rna均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛髮、細胞、活組織等dna擴增檢測。
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