1樓:匿名使用者
用tps法提取dna時加入tps,異丙醇及乙醇各有何作用高中:原理:
1.析出溶解在nac1溶液中的dna。
2.用冷酒精提取出含雜質較少的dna。
在沸水浴時被二苯胺染成藍色。
方法步驟:1.提取細胞核物質:順時針方向攪拌,稍快,稍重。 5 min2.溶解dna:
3.析出含dna的黏稠物:蒸餾水300ml,逆時針方向攪拌,緩慢4.過濾:取黏稠物。
5.再溶解:順時針方向攪拌,較慢。3 min6.過濾:取濾液。
7.提取出含雜質較少的dna,逆時針方向攪拌,稍慢。5 min8.dna的鑑定:沸水浴5min
大學dna提取分為三個基本步驟,每個步驟的具體方法可根據樣品種類、影響提取的物質以及後續步驟的不同而有區別。
利用研磨或者超聲破碎細胞,並通過加入去汙劑以除掉膜脂。
加入蛋白酶,醋酸鹽沉澱,或者酚/氯仿抽提,以除掉細胞內的蛋白,如與dna結合的組蛋白。
將dna在冷乙醇或異丙醇中沉澱,因為dna在醇中不可溶而黏在一起,這一步也能除掉鹽分。
另外,目前也有利用吸附過柱的方法提取dna的商業化試劑盒。
2樓:
二者沒有什麼本質區別。不過異丙醇沉澱效率高一些。用異丙醇沉澱的話等體積就可以了,用無水乙醇的話要用二倍體積去沉澱。
提dna時在異丙醇中加入氯仿異戊醇會有什麼影響
3樓:滿意喲
加入異丙醇。
會使dna沉澱,離心後dna和氯仿異戊醇。
一起沉到底部,這樣取上清就沒有意義了,還是重提吧。
什麼是tps 抽提液
4樓:網友
tps 抽提液(100 mmol tris-hcl(ph 10mmol edta(ph mol kcl
原理跟sds類似,效果稍差。
我提取dna總是在異丙醇沉澱時候沉澱出果凍狀的大塊是怎麼回事,我用的是ctab提取法。
5樓:網友
一般氯仿異戊醇都是室溫就可以了,你提取的什麼組織呢?
用酚抽提細胞dna時有什麼作用
6樓:果依波
三氯乙酸是一些大分子的沉澱劑,如蛋白質、dna等。
在feulgen反應中設定對照組,用熱的三氯乙酸處理固定後的樣品,將樣品中的dna抽提去,因此能作為feulgen反應的陰性對照。
具體的請參詳《組織化學與免疫組織化學》邱曙東。
dna提取中加入異丙醇為什麼變色
7樓:南霧嶺後
變渾濁吧,變成白色沉澱啦。是dna 和少量蛋白質析出。
提取dna時,用冷的異丙醇沉澱為什麼比常溫異丙醇效果會更好?
8樓:棠棠丶
提問的女孩 2011-1-13
因為低溫可以促進dna的沉。
澱,在dna量很少的情況。
比如你的實驗)可以提高。
抽提效率。不過如果dna量較多時,常。
溫也沒問題,比如我們做小。
鼠腳趾的基因型鑑定時,都。
是常溫操作的,沉澱照樣超多。
用dna提取試劑盒怎樣提取dna
dna提取試劑盒與苯酚氯仿提取dna法的異同 酚 氯仿方法是提取核酸的經典方法,主要原理是利用核酸 蛋白等雜質在水相和有機相中溶解度不同而重新分配。試劑盒原理是在特定溶液環境下 高鹽 低ph 使核酸吸附在固相介質 一般是矽膠膜 上,洗滌去除雜質後,再改變溶液環境使dna溶解到純水或te中。酚氯仿方法...
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a 加入洗滌劑bai 後,動du作要輕緩 柔和,zhi否則容易產生大dao量的泡沫,不利於後續步內驟地操作容,故a錯誤 b 利用蛋白酶分解雜質蛋白,從而使提取的dna與蛋白質分開,起到純化的作用,故b正確 c 加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以免dna分子 下列關於生物學實驗的描述錯誤的是 a...
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一般要50mm 的tris hcl緩衝液,恐怕你這個不符合要求,沒法配 dna裂解液配製 母液配製 1.500mmol tris hcl ph8.0 稱取15.1425g tris,加入150ml 蒸餾水,加入hcl調ph至8.0,定容至250ml。2.100mmol edta或edta na2 稱...