dna提取試劑盒與苯酚氯仿提取dna法的異同
1樓：網友
酚－氯仿方法是提取核酸的經典方法，主要原理是利用核酸、蛋白等雜質在水相和有機相中溶解度不同而重新分配。
試劑盒原理是在特定溶液環境下（高鹽、低ph)使核酸吸附在固相介質（一般是矽膠膜）上，洗滌去除雜質後，再改變溶液環境使dna溶解到純水或te中。
酚氯仿方法經典、便宜，用的都是實驗室常用試劑，提純效率和純度都很高，但缺點是費時費力，苯酚和氯仿還有一定毒性，我見過的實驗室很少有用這種方法的。
試劑盒嚴格來說也分好多種，經典的是離心柱的，就是把矽膠膜固定在離心管中，類似於超濾膜，用離心力或者負壓讓液體通過矽膠膜，核酸就留在膜上。在經過洗滌、洗脫的步驟得到核酸。這種方法的優點是操作簡單、時間短，現在也能達到很高的質量，**也不貴。
缺點是不易放大，需要多次離心。
試劑盒基本步驟是先使樣本裂解，在特定溶液中通過離心流過矽膠膜，再經過幾次洗滌，最後加上洗脫液，離心後核酸就溶解到洗脫液中。具體的你可以根據你自己的需要到網上查一下說明書，現在做試劑盒公司的很多，步驟大同小異。
試劑盒也不是一定很便宜，對一些難度高（病毒核酸、法醫樣本核酸）或者要求高（去內毒素）的用途也比較貴。還有一種磁珠法提取，不需要離心，易於放大，可以用於自動化操作。這種高階一點的產品基本上是外國公司壟斷的。
國內也有一批人在做這種磁珠，希望能打破這種壟斷。上海交大的古巨集晨教授和他創立的上海奧潤微納就是這批人的代表。（有點打廣告的嫌疑，看在碼了這麼多字的份上也可以理解哈）
核酸提取試劑盒的學問很多，有興趣的話還可以再交流。：）
2樓：鞠濟通尋桃
離心柱法的試劑盒提取，主要是利用裂解液促使細胞破碎，是細胞中的核酸釋放出來；苯酚氯仿提取dna，特點是dna的純度高，片段大，效果也較好，但是較為複雜。biodai的dna提取具體步驟如下：1.
請自行準備：無水乙醇、離心管。2.
取出洗滌液，按以下操作：a)
洗滌液a：21ml加入9ml無水乙醇；42ml加入18ml無水乙醇。b)
洗滌液b：9ml加入21ml無水乙醇；18ml加入42ml無水乙醇。c)
配製好的洗滌液如出現沉澱，可在37℃溶解，搖勻後使用。3.
取離心管，加入200μl樣本，4μldna
carrier混合均勻，加入300μl
裂解液及20μl
消化液，振盪混勻，56℃水浴10
分鐘。4.加入1000μl無水乙醇，輕輕顛倒混勻，如有半透明懸浮物，不影響dna的提取與後續實驗。5.
將吸附柱放入收集管內，將760μl上述溶液轉入吸附柱內，靜置2
分鐘，12,000
rpm4℃離心1
分鐘，棄收集管內廢液；6.
將吸附柱放**集管內，將剩餘760μl溶液轉移至吸附柱內，重複步驟。
將吸附柱放**集管內，加500μl
洗滌液a至吸附柱內，12,000
rpm4℃離心1
分鐘，棄收集管內廢液。8.
將吸附柱放**集管內，加500μl
洗滌液b至吸附柱內，12,000
rpm4℃離心1
分鐘，棄收集管內廢液。9.
將吸附柱放**集管內，12,000
rpm4℃離心2
分鐘，離去殘留的洗滌液。取出吸附柱，放入新的。
ml離心管內，加入30-50
l洗脫液，靜置3
分鐘，12,000
rpm4℃離心2分鐘，收集dna溶液。提取的dna即可用於下一步實驗或-20℃儲存。
使用dna基因組提取試劑盒提取的dna是否含有線粒體dna，可是用於線粒體dna的pcr擴增麼
3樓：網友
可以的。我是做這方面的，看過大量文獻，pcr技術沒出來前大家都是直接提取線粒體dna，然後酶切建庫，分別測序後在拼接組裝，pcr技術成熟後，就直接提取dna基因組，然後用線粒體dna引物去擴增。況且，現在有專門提取mtdna的試劑盒。
當然也可以手工提。我之所以這麼說，是因為我都親自做過，我用手工提過mtdna，然後用引物擴，也用總的基因組提取試劑盒，先提取總的dna，然後用同樣的引物去擴，都得到了自己的目的片段。（ps:
我在測線粒體dna全序列。這方面不懂得我們可以相互交流。872819949）
4樓：匡雅霜
有專門的線粒體dna抽提試劑盒。dna基因組抽提試劑盒提出來的基因組dna和線粒體dna混雜，比較難做pcr，但你也可以試試。
不用試劑盒如何純化dna，不用試劑盒如何純化DNA？
dna用等體積的酚 氯仿抽提一次，重複此步驟，加入兩倍體積的無水乙醇和1 10體積的3 mol l乙酸鈉溶液後混勻，零下20攝氏度沉澱30 min後12000 r min離心10 min，沉澱用75 乙醇洗滌一次，12000 r min離心5 min，棄上清，沉澱自然乾燥後溶於20 40微升去離子水...
用洋蔥為材料的dna粗提取後用二苯胺試劑檢測沸水浴後看不到實驗現象
a 加入洗滌劑bai 後，動du作要輕緩 柔和，zhi否則容易產生大dao量的泡沫，不利於後續步內驟地操作容，故a錯誤 b 利用蛋白酶分解雜質蛋白，從而使提取的dna與蛋白質分開，起到純化的作用，故b正確 c 加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要輕緩，以免dna分子 下列關於生物學實驗的描述錯誤的是 a...
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用cat試劑盒測cat為什麼對照管的吸光度比測定管低 cat試劑盒散仔 lifemall萊貿生物 是用來測定過氧化氫酶 cat 的活性的一種方法。cat是一種能夠分解過氧化氫 ho 的酶，過氧化氫在nm下有特徵吸收峰，所以cat的活性可以通過測量反應溶液nm下的吸光度變化來計算。對照管和測定管的區別...