用cat試劑盒測cat為什麼對照管的吸光度比測定管低
1樓：匿名使用者
cat試劑盒散仔（lifemall萊貿生物）是用來測定過氧化氫酶（cat）的活性的一種方法。cat是一種能夠分解過氧化氫（h2o2）的酶，過氧化氫在240nm下有特徵吸收峰，所以cat的活性可以通過測量反應溶液240nm下的吸光度變化來計算。
對照管和測定管的區別是，對照管中不含有樣品，而只含有緩衝液和過氧化氫溶液。對照管的目的是消除其他因素對吸光度的影響，比如緩衝液、試劑盒、儀器等。所以，對照管中沒有cat酶參與反應，過氧化氫不會被分解，吸光度會保持相對穩定。
而測定管中含有樣品，樣品中的cat酶會分解過氧化氫，使得反應溶液240nm下的吸光度隨時間而下降。而測定管中的吸光度則代表著樣本中的戚啟過氧化物酶活性。
然而，如果對照管中的吸光度總是比測定管低，那麼可能是因為試劑盒存在某些不完全消除的汙染物，或者試劑盒的成分存在微小差異。這些汙染物或差異會導致對照管中形成乙個比零稍微高一點的吸光度基線，使得對照管中的吸光度總是比測定管低。
為了解決這個問題，可以嘗試使用新的試劑高掘如盒或者更換試劑盒的某些組分，以確保對照管中的吸光度為零。同時，需要注意嚴格按照試劑盒說明書中的步驟進行操作，儘可能減少人為因素對結果的干擾。
2樓：網友
1、磨樣不充分。
2、測吸光度前沒有充分混勻。
3樓：匿名使用者
做實驗不看說明書？？？很顯然你的對照管吸光度比測定值小 是相當正常的 如果反之你測的大的話 那估計得跪了。。。那就變源慎負值了。。
cat酶的資料處理方法。其實我也不知道。不會問度娘雹衝敬麼？
自學能力啊 我歷來不懂的都是問谷歌。。自行解決問題。。除非是實在判手迫不得已了。
cat活性測定時為什麼對照管的吸光值比測定管要低呢
4樓：網友
~根據測量吸光煮死酶液過氧化氫無法分解~強烈吸收使其比樣品管的吸光值大~ a240 = as0－(as1+as2)/2~ 必然的吧。
5樓：網友
我也想知道你解決這個問題了嗎？我也遇到這個問題了。
6樓：小小魚淚了
我跟你遇到情況一樣。。。吸光值沒變。。。請問你解決這個問題了麼。
sod,cat酶活性測定遇到問題了，哪位大哥大姐可以幫幫我？急！！！？
7樓：紅顏
cat時，每隔一分鐘讀一次數，但是讀數時吸光度總是不穩定，可能是因為加液後未充分混勻。我們通常計前500秒的，因為都是測初速度嘛，取其中均勻變化（直線變化的區段）。nbt光還原法測sod時，對照管（就是照光不加酶液的那一管，不是空白調零管）的吸光度總是比樣品測定管的低我們也遇到過，不過當時我們的對照值也很小，加酶的也很小，基本是由於誤差造成，實際上就是實驗失敗，後來把試劑*（放的時間有些長了）換了就好了。
檢視原帖》
用紫外吸收法測定cat的活性，出現負值合適嗎？
8樓：
我也在做這個測定~要死了 每次資料都不太準~~有時候測量組的吸光值居然大於煮死的那組！
你是用什麼調零的？校對。
調零管是不加酶液不加h2o2 用緩衝液。
代替酶液和h2o2。
理論上講，加入煮死酶液對照管的吸光值應該是最大的（h2o2越多 吸光值越大嘛~~）所以出現負值一定不對。這說明你測定的這管煮死的酶液裡的h2o2比調零的那管還要少（但按理說 調零那管應該是沒有h2o2的）。如果加入煮死酶液對照管的吸光值都已經是負值了，那其他測量管就更「負」了~~
至於為什麼出現負值 原因有很多~~檢查一下分光光度儀的波長有沒有調到240nm，或者可能是調零管弄錯了，有沒有到25℃我覺得關係不大~
sod 酶時為什麼我的對照管吸光度值比測定值小
9樓：匿名使用者
親，對照管的底物都沒反應，它的酶濃度肯定高呀。酶活力的資料用測定管的吸光度。
減掉對照管的吸光度再除以。
10樓：匿名使用者
做實驗不看說明書？？？很顯然你的對照管吸光度比測定值小 是相當正常的 如果反之你測的大的話 那估計得跪了。。。那就變負值了。。
cat酶的資料處理方法。其實我也不知道。不會問度娘麼？
自學能力啊 我歷來不懂的都是問谷歌。。自行解決問題。。除非是實在迫不得已了。
您好，能否提供sod，cat,pod,mda的測定方法和具體操作時的注意事項啊？
11樓：網友
採用法測定sod酶活性。在黑暗條件下，向小燒杯中分別加入： 磷酸緩衝液4ml、30mmol/ldl-甲硫氨酸 核黃素，上述提取出的各處理的酶液，以不加nbt和酶液但用緩衝液代替的混合液作為校零對照，測最大值時只不加入酶液但用緩衝液補齊，加完所有的物質後，在人工培養箱中用日光燈光照25分鐘後，用分光光度計在波長560nm的情況下測定各管的od值。
以能抑制反應50％的酶量為乙個sod單位，其活力可由下面的公式計算：
sod活力(u/mg蛋白)= (對照管吸光度-測定管吸光度)/對照管吸光度/
50％)×加入粗酶液中的蛋白質含量(mg)]
3過氧化物酶（pod）的測定：
磷酸緩衝溶液(pbs)（ph=溶液的配製： na2hpo4•12h2o + nah2po4•2h2o,定容到1000ml。
溶液的配製：吸 30%h2o2，用 ph=磷酸緩衝溶液(pbs)定容到250ml。
愈創木酚溶液的配製：稱愈創木酚，用 ph=磷酸緩衝溶液(pbs)定容到250ml。
2ml 溶液 + 愈創木酚溶液 + 1ml ph=磷酸緩衝溶液(pbs) +原來為酶液（根加酶液）（對照用磷酸緩衝溶液代替酶液）（做三個重複），記錄470nm處od降低速度。將每分鐘od增加定義為1個活力單位。
參考陳建勳，王曉峰主編的《植物生理學實驗指導》p121）
比色時加酶液，混合後即刻計時。
04級 採用愈創木酚法測定pod酶活性。取光徑1cm的比色杯2只，乙隻中加入反應混合液3ml，磷酸緩衝液1ml作為較零對照，另乙隻中加入反應混合液3ml，磷酸緩衝液，上述提取得酶液，立即開啟秒錶計時，於分光光度計470nm波長下測定od值，每隔一分鐘讀數一次，以每分鐘od變化值表示酶活性大小，即以△od470/min•mg蛋白質(或鮮重g)表示。
12樓：手機使用者
我有cat的，但是它只告訴你試劑。
一、試劑。二、試劑三，你不知道每個試劑是什麼，我們破解了。自己查文獻做標準曲線做出來的更準確。 這個一般買了他才。
在測過氧化氫酶cat活性時，吸光度總是變化在0.001左右？有時隔一分鐘吸光度都不變？為何？不吝賜教！
13樓：
是樣品的吸光度。
只在還是在範圍內跳動。
如樣品吸光度只有，需要加顯色劑後做。
如樣品是在範圍內跳動，說明樣品很穩定。
no試劑盒，為什麼測的空白組的吸光度總比樣品的吸光度大啊，測出的都是負值
14樓：網友
在比色皿中都加入蒸餾水測定比色皿間的誤差，可能比色皿的誤差過大了，如果樣品的吸光度本身比空白大不了多少的話有可能的，這時需要比色皿配對了，找誤差最小的那兩隻做分析。或者標出比色皿間的誤差參與分析後的計算也可以的。也可以直接換新的比色皿測量。
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