為什麼用鹼法提取質粒，電泳後沒有出現條帶呢？
1樓：網友
嘛，這個原因多了。
1、你確定你提取質粒收的菌沒有被汙染？我曾經就遇上過這種事，提了n遍都沒結果，淚奔……最後重新挑單菌落接種重提。你得確定你的菌裡面有質粒哦~
2、你瓊脂糖凝膠濃度和質粒大小相配麼？假如濃度太低的話沒跑一會條帶就跑出膠外了~還有，你跑了多少時間？
3、你solutionii和solutioniii是不是超時了？或者**太劇烈弄成碎片了？
4、如果提取質粒的是dh5a的菌可以源者握省下酚氯仿。
抽提這步，你看看是不是這部出問題了？
5、無水乙醇。
沉澱時候最好冰浴20分鐘，我後來發現用預冷的無水乙醇沉澱效果不如冰嫌螞浴好。
乙醇洗滌，嘛，你要雹慶是取質粒來做轉化的洗不洗也罷。你可以先不洗，先檢測你是否提出來了。
7、無水乙醇揮發了再加水——切記這點。
2樓：幽玄冰
1.做膠的時候沒加eb或其他染料。
2.膠濃度亂棚太低，電泳時間過長，跑出去了。
3.你提團野的塌陪喊菌中根本就沒有質粒。
4.產物中乙醇含量過高，點樣時漂出孔。
3樓：網友
是不是跑得時間太短，質粒在點樣空還沒有跑出去？
質粒提取後不幹燥能電泳檢測嗎?
4樓：***
你是說醇沉之後的乾燥吧？要乾燥，否則殘留的乙醇會影響酶切等實驗。如果很少，對電泳影響應該不大。但最好按程式操作，否則以後麻煩。
乾燥很快，不要過分乾燥，否則難溶。棄上清，瞬時離心，吸去殘留乙醇，加水溶解即可。
5樓：網友
還需要乾燥嗎？我們好像都是直接電泳的啊。這個我真的查查去。
鹼裂解法提取質粒後 電泳拖尾嚴重，是什麼原因
6樓：再回首恍然銣夢
和marker平齊的是完整質粒，後面的應該是開環dna，整體挺清楚的，也沒有滯後或者拖尾的現象但是1和2亮度明顯低證明質粒的量比3和4少。
7樓：網友
拖尾嚴重的話說明質粒有降解，形成不同大小的片段，條帶特異性差。
為什麼pcr之後的電泳會出現這樣的條帶
8樓：南京金益柏生物科技****
說明目的基因已經擴增得到。
9樓：匿名使用者
第。
二、可以考慮轉殖測序，這樣不容易產生結合。cindybrella(站內聯絡ta):tiger28:
幫頂！我也不懂~哎：tiger19:
jiaxinfish(站內聯絡ta)b保險點的話還是做個taclone再測序，如果不想做ta,就用2個pcr引物直接測序，總會成功乙個的吧blackrose8089(站內聯絡ta)換個測序公司試一下，有的公司就是轉殖在載體上也測不出來！zoey21(站內聯絡ta)我的pcr產物電泳很好，測序也是結合問題。測序公司反饋說是產物不純，或者引物特異性不好。
你可以考慮重新優化反應體系（不過看來你是不做這步了）,或者把目的片段序列告訴測序公司，他們會設計中間引物安排測序。
提取的質粒跑電泳有兩條帶是怎麼回事
10樓：匿名使用者
不知道你提的質粒應該是多大的？提取到的質粒可能出現三條帶，最前面的是雙鏈閉合環狀的，其次是線狀的，最後面的是會出現一些複製中間體。感覺的帶跟中的任何一條都不同，如果24是酶切後的線性條帶，那3前面那條和1就是閉環的，3後面的是複製中間體。
後面的帶'號的是什麼？仔細看了下，124也是兩條帶，只是後面那條量少，不易觀察。如果24是處理後的，我感覺前面那條帶的電泳遷移率是有變化的，說明你用的化合物跟質粒有相互作用。
質粒有兩條帶時不好準確判斷是哪兩條，建議你用個單一切點的酶處理一下質粒，也就是讓它產生線狀dna，然後作為對照就知道樣品裡的兩條帶是哪兩條了。
抽提質粒dna後跑電泳，什麼都沒有這些我都做了
11樓：匿名使用者
正常操作實驗中提取質粒應該出現2條條帶，由於空間結構的差異，從上至下第一條為較為鬆散的dna環狀結構，第二條是環狀dna超螺旋結構，有時往往會存在第三條帶（出現在鬆散環狀質粒dna條帶上方），即為dna開環結構（由於質粒提取過程中閉合環狀dna遭到破壞，環狀結構開啟變為直鏈dna）。
質粒跑電泳，一般會出現2條帶。下面的那條是由於質粒超螺旋形成的，上面那條是因為處於鬆散結構的質粒 沒有條帶，如果旁邊的marker沒問題的話，說明你提的質粒沒成功。如果maker也沒有，說明你的電泳出了問題。
鹼裂解法提取質粒時，先加的緩衝液使菌體懸浮的原因是什麼
12樓：網友
不知道，我只是看看。
質粒電泳條帶分析，我們要提取質粒dna.但是我的只出現了一條帶，而且明顯這條帶不是超螺旋dna.請
13樓：網友
質粒電泳，並不一定會有明顯的兩條帶的，和是否有蛋白汙染，電泳液的成分，ph值等都有很大關係。
你的圖上看，還是有一條比較淡的條帶在前面。而粗亮的這條應該就是沒有超螺旋的了。
質粒跑電泳為什麼會有三條帶
14樓：瑞麗詩史醫生
正常情況吧，分別為超螺旋，開環，和複製中間體。
最後一步不用eb，用滅菌蒸餾水試試。
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