1樓:
油紅o染色液主要由油紅o異丙醇飽和液組成,利用染料易溶於脂質的性質證明組織脂質含量的多少。適用於細胞學與組織學研究的切片觀察。但滲透慢,不能長期儲存;冰凍切片附貼於載玻片後,立即放入恆冷箱中的固定液固定1分鐘後即可染色。?
染色後脂滴呈橘紅色。下面來了解一下油紅o染色步驟有哪些。
油紅o染色步驟。
試劑的油紅o溶液。
100ml): 油 紅o :
70%乙醇 : 50ml
丙酮 : 50ml
需要的其他試劑:異丙醇、乙醇、丙酮、蘇木素(hematoxylin)染色步驟:
1.將冰凍切片(厚度為4-8um)常溫乾燥15-20min.
2.100%異丙醇孵育5分鐘(避免把水帶入油紅o)。
3.的油紅o溶液孵育7-8分鐘(在60 oc烤箱)4.85%異丙醇溶液洗3分鐘。
5.雙脫水洗。
6.蘇木素染。
7.雙脫水洗。
8.封片劑封片。
結果: 脂質呈紅色或者橘黃色。
細胞核呈淡藍色。
油紅o染色步驟注意事項:
1 由於易溶於有機溶劑,所以一般用冰凍切片染色來顯示。
2 作染色的冰凍切片不能太薄,過薄的切片常會使脂質丟失。
3 蘇木素復染時間不能過長。
4 染色結果不能長期儲存,應儘快觀察。
以上便是油紅o染色步驟,油紅o染色常用作染。脂類染色法最常用以證明變性,栓子以及腫瘤的鑑別。脂類染色使用最廣泛的染料是蘇丹染料,最常用的有蘇丹ⅲ,蘇丹ⅳ,蘇丹黑及油紅o等。
被染色,實際上是蘇丹染料被溶解吸附而呈現染料的顏色。脂類染色,用冰凍或石蠟切片,以水溶性封固劑封固,如甘油明膠和阿拉伯糖膠等。
油紅o染色後怎麼看含脂滴的肝臟細胞
2樓:小周高等教育**答疑
%中性甲醛的配製。
材料:中性甲醛(多聚甲醛) 密封瓶。
稱取1g中性甲醛粉末,加入10ml的三蒸水中,密封,在60度水浴中過夜才能溶解。配好的溶液1個星期內有效,最好4度儲存。
2、染色液的配製。
材料:油紅染料 棕色可密封瓶 異丙醇 研缽 漏斗 定性濾紙。
稱取預先研磨粉碎的油紅乾粉,溶於少量異丙醇中,然後加異丙醇至100ml,棕色瓶密封(或錫箔紙包裹避光)4℃儲存,為儲存液,可長期儲存。用時取6ml加三蒸水4ml混勻,定性濾紙過濾,稀釋後數小時內用完。
3、培養載體 3毫公升培養瓶。如果培養載體為塑料製品,hoechst33342染核的話,塑料板自發螢光也為藍色,必須考慮。
4、.染色物件 間充質細胞脂肪誘導後不同時間段。
5、注意事項:
脂肪油紅染色,有的是動物/人體脂肪組織切片,或細胞爬片。各有操作差異。以下是各論壇方法小結,不全。
1).完全成熟飽滿的脂肪細胞,容易破裂,脂滴洩漏,所以壓片,切片都要考慮到這個問題。
2).細胞爬片細胞溶液脫落,特別是脂滴大的。操作務要輕柔。不要把細胞沖掉。
3).如果做脂肪組織冰凍切片,冰凍溫度比普通要低,切片厚度加厚。
6、染色步驟:
1) 先小心輕緩倒去培養夜。
2) 用pbs輕緩漂洗(不洗沒問題)。
3)加10%中性甲醛固定30min(實際固定時間過夜都沒問題。固定液用95%酒精也可)。固定的是細胞膜。
4) 稀釋油紅儲存液,油紅:去離子水=3:2,濾紙過濾,室溫放置10min(除去一些雜質,染色結果更清晰)。
5)染色10min左右,加的體積覆蓋住板底即可,如6孔加,24孔加實際染色時間1小時都可以)。
6)脫色,用75%酒精/60%異丙醇漂洗,除去多餘的染料(實際用其他平衡液洗也沒問題,背景並不會殘留多少)。
7) 復染,淡蘇木染色1/5分鐘,pbs漂洗(這一步不做也可,看試驗需要,並且蘇木素會把胞漿染紅,如要顯示核, hoechst33342也可以,濃度5微克/毫公升染10分鐘即可把核染上)。
8)甘油明膠封片(封片後可長期儲存)。
9)顯微鏡觀察。
血管油紅o染色後如何統計病變面積比
3樓:網友
看看綠色——青春、和平、朝氣 輕鬆舒爽、賞心悅目的色彩。是永遠用不完,永遠不會讓人感到厭煩的主題; 因為它的每一點變化,都對應著自然給人類的印象,所以綠色適合所有喜歡它的人。 生活在綠的空間裡,夢都是清新的。
明快而錯落,讓人彷彿來到青山翠谷。
請問高手 我做脂肪肝病理切片的,h&e染色和油紅o染色是不是都要做?這兩種染色有什麼區別?
4樓:網友
儘量不要服藥,特別是西藥。脂肪肝在年齡大的人群裡面很常見,特別是體型較胖的人,主要在生活上面調節就可以,三高(高脂肪,高蛋白,高膽固醇)食品(臘魚、臘肉、淹菜、泡菜等)絕對不可以吃,清淡飲食,多泡腳,腳是人體第二心臟,經絡通臟腑,可以保證人的代謝。
可以用中藥來調理,嵩山首烏茶就很不錯,這個是純中藥的。這個是我家裡的人在醫院體檢時醫生推薦用的 說是嵩山首烏茶對脂肪肝效果不錯。
5樓:匿名使用者
我現在是中度脂肪肝,主要還是吃的是醫生給我推薦的美國利福來的產品,效果不錯,吃了以。
後,脂肪肝還是有明顯的改善的。就是**剛買的時候有點高,前天我從**上又買了,便宜。
了很多,後來比較了一下,確實是**,最近還是在繼續服用這個產品,那個醫生是留美回來。
的,他說在美國這個是最暢銷的消除脂肪肝的保健品。
油紅o染色 和免疫組化可不可以同時做啊?
6樓:網友
油紅o可能行不通的,你最好還是在丁香園問問。
細胞的油紅o染色 75%洗多久合適
7樓:北京索萊寶科技****
一般染色10-15min,細胞的話時間可以短一些,切片可以長一些,具體的要根據細胞的型別,切片的厚度等進行調整。
油紅o生物染色劑,澱粉凝膠電泳中作類脂和脂蛋白染色。顯微技術中用作脂肪染色劑。油紅 是一種油溶性偶氮染料。
易溶於苯,溶於乙醇(呈淺黃色紅色)和丙酮。在濃硫酸中呈淺藍綠色,稀釋時產生藍紫色沉澱。
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