1樓：北京索萊寶科技****
操作步驟：
樣品處理：a. 植物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨，把粉末加入到1ml裂解液中混勻。
b. 動物組織：取新鮮或-70℃凍存100mg組織加1ml裂解液，用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
c. 貼壁細胞：直接在培養板中加入裂解液裂解細胞，每106細胞加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。
d. 細胞懸液：離心收集細胞。每106動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加1ml裂解液混勻。
e. 血液處理：取新鮮血液加3倍體積紅細胞裂解液，混勻後室溫放置10分鐘，10000rpm離心1分鐘。
棄上清，若沉澱含有紅細胞，可加入2倍體積紅細胞裂解液重複裂解步驟。離心後沉澱加入1 ml裂解液混勻。
將處理後的樣品在室溫放置5分鐘，使得核酸蛋白複合物完全分離。
向勻漿樣品中加氯仿，蓋好管蓋，劇烈振盪15秒，室溫放置3-5分鐘。
2-8℃ 12000 rpm離心10分鐘。rna主要在上層無色的水相中，把水相轉移到新管中，不要吸到沉澱。
吸附柱前處理：在吸附柱中加入500ul 洗柱液，室溫放置2分鐘，2-8℃ 12,000 rpm離心2min，棄廢液。6.
第4步收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻，加入吸附柱靜置2分鐘，2-8℃ 12000rpm離心2min，棄廢液。7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，2-8℃ 12,000 rpm離心2min，棄廢液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液，2-8℃ 12,000 rpm離心2min，棄廢液。9.
12000rpm離心2min，棄掉收集管，將吸附柱置於室溫放置數分鐘將吸附柱中殘餘的漂洗液去除。10. 將吸附柱放入新管中，向膜**滴加50-100ul rnase free ddh2o，室溫放置5min，12000rpm室溫離心2min即得到rna。
rna在水溶液中od值可能在之間，但這並不表示rna不純，需電泳檢測。
誰用過sigma植物細胞核提取試劑盒
2樓：匿名使用者
葉綠體是植物細胞中由雙層膜圍成，含有葉綠素能進行光合作用的細胞器。葉綠體基質中懸浮有由膜囊構成的類囊體，內含葉綠體dna。是一種質體。
質體有圓形、卵圓形或盤形3種形態。葉綠體含有的葉綠素a、b吸收綠光最少，綠光被反射，故葉片呈綠色。容易區別於另類兩類質體──無色的白色體和黃色到紅色的有色體。
葉綠素a、b的功能是吸收光能，少數特殊狀態下的葉綠素a能夠傳遞電子，通過光合作用將光能轉變成化學能。葉綠體扁球狀，厚約微公尺，直徑約5微公尺。具雙層膜，內有間質，間質中含呈溶解狀態的酶和片層。
片層由閉合的中空盤狀的類囊體垛堆而成，類囊體是形成高能化合物三磷酸腺苷(atp)所必需。是植物的「養料製造車間」和「能量轉換站」。能發生鹼基互補配對。
細胞在核酸裂解液中rna穩定麼
3樓：空_空_不_空
原則上細胞膜裂解後，rna就不穩定了。
但是一般核算裂解液中都會有rna酶的抑制成分，能抑制。
但依然建議裂解後儘快進行後續步驟，去除其他成分。
4樓：鵝子野心
不穩定，核酸裂解液會使rna斷裂。
細胞高速12000rpm離心後再加細胞裂解液還能提的出蛋白麼
5樓：匿名使用者
提蛋白時加入裂解液後一般不可以不離心即凍存的 加入裂解液後，細胞就會裂解，之後各種蛋白酶都會啟用。放一段時間很多丰度不高的蛋白就檢測不到了，即使是凍存但是在凍上（液氮除外）和凍融的過程中，不能保證所有蛋白酶都不發揮活性。所以提蛋白時加入裂解液後一般不可以不離心即凍存的。
是否能從細胞培養液中提取rna進而做pcr
6樓：幻世殺
細胞外的rna 通常是mirna了，血漿可做，培養上清也可以，但rna的提取需要特殊試劑盒，細胞外rna通常在外泌體，不過看你要做哪方面的實驗，一般來說檢測培養上清中的rna沒有太大意義。
trizol裂解細胞後可以按照rna提取試劑盒提取嗎
7樓：名傑**
總rna提取試劑盒（trizol法）
ripure試劑是直接從細胞或組織中提取總rna的試劑。它在破碎和溶解細胞時能保持rna的完整性。加入氯仿後離心，樣品分成水樣層和有機層。
rna存在於水樣層中。收集上面的的水樣層後，rna可以通過異丙醇沉澱來還原。在除去水樣層後，樣品中的dna和蛋白也能相繼以沉澱的方式還原。
乙醇沉澱能析出中間層的dna，在有機層中加入異丙醇能沉澱出蛋白。共純化dna對於樣品間標準化rna的產量十分有用。
無論是人、動物、植物還是細菌組織，該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。tripure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個的樣品。所有的操作可以在一小時內完成。
tripure抽提的總rna能夠避免dna和蛋白的汙染。故而能夠作rna印跡分析、斑點雜交、poly(a)+選擇、體外翻譯、rna酶保護分析和分子轉殖。如果是用於pcr，當兩條引物位於單一外顯子內時，建議用擴增級的dnase i來處理抽提的總rna。
tripure試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種rna的析出。例如，從大鼠肝臟抽提的rna瓊脂糖凝膠電泳並用溴化乙啶染色，可見許多介於7 kb和15 kb之間不連續的高分子量條帶(mrna和hnrna成分)，兩條優勢核糖體~5 kb (28s)和~2 kb(18s)，低分子量rna介於和 kb之間 (trna, 5s)。當抽提的rna用te稀釋時其a260/a280比值≥。
適用範圍：適用於各種動植物組織/細胞總rna、dna、蛋白的快速抽提用杭州昊鑫生物的。
8樓：網友
先加rna抑制劑，然後冰上提取，操作儘量快。
這個公司，武漢勤致傑生物，我用了。根本提不出來，全降解了，付錢之前騙人說多好用，售後的時候態度超級差，毀我樣本，給我氣收。
細胞核為什麼不是越大越好？衰老細胞的細胞核為什麼變大
細胞bai核的大小 一般7微米左右 細du胞衰老zhi時細胞內呼吸dao速度減慢，細胞核體版積增大，核膜權內折，染色質收縮，顏色加深。線粒體數量減少，體積增大 總體來說老化細胞的各種結構呈退行性變化。衰老細胞的形態變化表現有 1 細胞核 增大 染色深 核內有包含物 2 染色質 凝聚 固縮 碎裂 溶解...
為什麼DNA主要在細胞核中,RNA主要在細胞質中
dna上的鹼基排列順序就是遺傳資訊，dna攜帶著遺傳資訊，與蛋白質一起組成了染色體，染色體存在於細胞核中，所以dna也存在於細胞核中。細胞 時，dna先複製，然後均分。另 線粒體和葉綠體這樣的細胞器中也存在著少量的dna。所以我們說，dan主要存在於細胞核中。rna包括mran trna等，主要是在...
導管細胞的結構是甚麼有沒有細胞膜，細胞核
導管 vessel 植物體內木質部中主要輸導水分和無機鹽的管狀結構.為一串高度特化的管狀死細胞所組成,其細胞端壁由穿孔相互銜接,其中每一細胞稱為一個導管分子或導管節.導管分子在發育初期是生活的細胞,成熟後,原生質體解體,細胞死亡.在成熟過程中,細胞壁木質化並具有環紋 螺紋 梯紋 網紋和孔紋等不同形式...