1樓：網友
出現非特異性擴增帶。
pcr擴增後出現的條帶與預計的大小不一致，或大或小，或者同時出現特異性擴增帶 與非特異性擴增帶。非特異性條帶的出現，其原因：一是引物與靶序列不完全互補、 或引物聚合形成二聚體。
二是mg2+離子濃度過高、退火溫度過低，及pcr迴圈次數 過多有關。其次是酶的質和量，往往一些**的酶易出現非特異條帶而另一**的酶 則不出現，酶量過多有時也會出現非特異性擴增。其對策有：
必要時重新設計引 物。②減低酶量或調換另一**的酶。③降低引物量，適當增加模板量，減少迴圈次 數。
適當提高退火溫度或採用二溫度點法(93℃變性，65℃左右退火與延伸)。
pcr後電泳是特異性條帶，但測序總是出現結合問題.怎麼辦
2樓：北京索萊寶科技****
第一序列多長？
第。二、可以考慮轉殖測序，這樣不容易產生結合。
pcr反應產物**現非特異條帶的原因是什麼
3樓：匡雅霜
原因有很多：
最重要的可能性是pcr引物的特異性可能不夠好也有可能是退火溫度太低。
也有可能是buffer中鎂離子濃度太高。
還有可能是酶量太多，甘油太多，或者酶本身的特異性不太好當然還有可能是你的目的條帶本來就應該有許多條，這個你得根據自己的實驗進行具體分析了。
請教：pcr擴增老是出現非特異性條帶是什麼原因
4樓：龍鳳油洺月
引物特異性不好；
退火溫度太低；
樣本中有多套模板；
酶過量鎂離子過量。
延伸時間過長。
dntp過量。
pcr電泳出現多條帶
5樓：奧力奧
這是引物的特異性問題。
需要重新設計引物。
提高退火溫度沒用 現在是序列太多 而不是退火和延伸的事。
pcr電泳跑出來的條帶為什麼這樣
6樓：彭昌進
電泳時條帶跑出凝膠的原因如下： 跑膠的時間太久，電壓最好不要太高 膠的濃度配低了 膠是不是沒有完全被電泳槽托住，這樣樣本就沉到電泳液裡去了 膠不均勻或者有氣泡 膠塊跟電泳槽不平行。
pcr 電泳 沒有條帶
7樓：啦炒
重複一遍再來發帖。自己先儘量剔除操作失誤別人才能更好的幫你。
乙個亮乙個不亮，如果每次都這樣，那說明模板量少，或是目標條帶短（條帶短自然結合eb少）。其他像擴增效率，試劑汙染等因素概率比較少。
2，沒產物：一來引物有沒有問題，二，模板有沒有問題，三，你的pcr條件是否合適你的引物。
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