為什麼大腸桿菌是目前應用最廣的外源基因表達體系
1樓:網友
遺傳背景清楚;培養週期短;目標基因表達水平高;抗汙染能力強;代謝途徑和基因表達調控機制比較清楚;已有大量可供選擇利用的表達載體。
1. 對大腸桿菌的遺傳背景和生理特性研究已相當徹底,已有很多不同抗藥性。
不同營養依賴型和不同校正突變型的菌種供選擇應用,可以根據不同的載體而選擇不同的菌種;
2. 儘管大腸桿菌細胞的空間小,但繁殖能力強,在營養條件充足時,20~30min即可繁殖一代,而且大規模發酵成本低,具有巨大的生產潛力;
3. 表達水平一般較真核系統高,某些外源基因在大腸桿菌中的表達量可達總蛋白。
的5 %~30 %,且下游工藝簡單、易於控制。
4、全基因組測序。
共有4405個開放型閱讀框架;
5、基因轉殖表達系統成熟完善;
6、繁殖迅速,培養簡單、操作方便、遺傳穩定;
7、被美國fda批准為安全的基因工程。
受體生物。
2樓:孫大炮啊
因為大腸桿菌中的質粒可以dna重組,然後匯入受體細胞,培育轉基因物種。
3樓:晚晴青山綠水
因為大腸桿菌的基因組是目前來講了解最多的,又便於培養,對各種外援基因的表達情況好觀察。
4樓:網友
大腸桿菌表達系統遺傳背景清楚,目的基因表達水平高,培養週期短,抗汙染能力強等特點, 是分子生物學研究和生物技術產業化發展程序中的重要工具。
外源基因在大腸桿菌中的表達問題
5樓:鵝子野心
生物體對密碼子的偏愛性:
不同的生物,甚至同種生物不同的蛋白編碼基因,對於同一氨基酸所對應的簡併密碼子,使用頻率並不相同,也就是說生物體基因對簡併密碼子的選擇具有一定的偏愛性。決定這種偏愛性的因素有三:
a. 生物基因組中的鹼基含量。
在富含at的生物(如單鏈dna噬菌體fx174)基因組中,密碼子第三位上的u和a出現的頻率較高,而在gc豐富的生物(如鏈黴菌)基因組中,第三位上含有g或c的簡併密碼子佔90%以上的絕對優勢。
b. 密碼子與反密碼子相互作用的自由能適中的作用強度最有利於蛋白質生物合成的迅速進行;弱配對作用可能使氨醯基trna分子進入核糖體a位需要總費更多的時間;而強配對作用則可能使轉肽後核糖體在p位逐出空載trna分子耗費更多的時間。
如ggg、ccc、gcg、ggc、aaa、uuu、aua、uau等使用少;
如gug、cac、ucg、agc、aca、ugu、auc、uug等使用多;
c. 細胞內trna的含量。
密碼子偏愛性對外源基因表達的影響。
由於原核生物和真核生物基因組中密碼子的使用頻率具有不同程度的差異性,因此,外源基因尤其是哺乳動物基因在大腸桿菌中高效翻譯的乙個重要因素是密碼子的正確選擇。一般而言,有兩種策略可以使外源基因上的密碼子在大腸桿菌細胞中獲得最佳表達:
a. 外源基因全合成。
b. 同步表達相關trna編碼基因。
2.載體的選擇。
所用表達載體必須是大腸桿菌表達載體,含有大腸桿菌rna聚合酶所能識別的啟動子(如pl、tac、t7等)和sd序列。
1)核糖體結合位點。
外源基因在大腸桿菌細胞中的高效表達不僅取決於轉錄啟動的頻率,而且在很大程度上還與mrna的翻譯起始效率密切相關。大腸桿菌細胞中結構不同的mrna分子具有不同的翻譯效率,它們之間的差別有時可高達數百倍。mrna翻譯的起始效率主要由其5『 端的結構序列所決定,稱為核糖體結合位點(rbs)
2)大腸桿菌核糖體結合位點的特徵。
位於翻譯起始密碼子上游的6-8個核苷酸序列5』 uaaggagg 3』,即shine-dalgarno(sd)序列,它通過識別大腸桿菌核糖體小亞基中的16s rrna 3』端區域3』 auuccucc 5』並與之專一性結合,將mrna定位於核糖體上,從而啟動翻譯;
外源基因在大腸桿菌中的高效表達受到很多因素影響,其中sd序列的作用是
6樓:穎子
外源基因在大腸桿菌中的高效表達受到很多因素影響,其中sd序列的作用是提供乙個核糖體結合位點。
對於乙個細胞來說,內源dna是其基因組的序列(本身生物就有的dna),而外源的dna是通過基因工程匯入的其他物種或細胞的dna,也可以是人工合成的一段dna。備高。
基因有兩個特點,一是能忠實地複製自己,以保喊攜持生物的基本特徵;二是基因能夠「突變」,突變絕大多數會導致疾病,另外的一小部分是非致病突變。非致病突變給自然選擇帶來了原始材料,使生物可以在自然選擇中被選擇出最適合自然的個體。
大腸桿菌:
大腸桿菌(學名:escherichia coli(t. escherich 1885)),腸桿菌科埃希氏菌屬大腸埃希氏菌。
由escherich在1885年發現。周生鞭毛,能運動,無芽孢。
大腸桿菌為革蘭氏陰性短桿菌,能發酵多種糖類產酸、產氣,是人和動物腸道中的正常棲居菌,嬰兒出生後即隨哺乳進入腸道,與人終身相伴,幾乎佔糞便乾重的1/3。主要生活在大腸內。有少部分特殊型別的大腸桿菌具有相當強的毒力,一旦感染,將造成嚴重疫情。
仿滲尺。
大腸桿菌為什麼常選為宿主菌用於基因工程??
7樓:新科技
第一,大腸桿菌是一種常見菌種。人們對其細胞形態及生理生化特性已經瞭解比較深入,對於培養基配製與運載體匯入的具體技術等方面也就更容易把握。
第二,細菌質粒(遊離於細菌等微生物細胞質中的小型環狀dna分子)是基因工程常用的運載體(與目的基因結合的工具),而大腸桿菌質粒又是最常用的質粒,因為大腸桿菌質粒上有諸如抗青黴素基因等易於檢測的標記基因,並且容易使目的基因在宿主細胞中複製和表達。而最適合大腸桿菌質粒完成使命的場所當然就是它的天然**—大腸桿菌。
第三,大腸桿菌是一種典型兼性厭氧行細菌,由於體積小,表面積與體積的比例很大,並且能利用氧氣進行徹底生物氧化釋放大量能量,因而能夠與外界迅速進行物質和能量交換,並在體內迅速轉化。這樣一來使大腸桿菌新陳代謝極其迅速,就如同乙個效率極高的化工廠,而與真正化工廠相比所需反應條件又很溫和,容易達到,其經濟效益是顯而易見的。
綜合以上考慮大腸桿菌常選為宿主菌用於基因工程也就不足為怪了,1,大腸桿菌為什麼常選為宿主菌用於基因工程?
它比其他菌的優勢有哪些?
大腸桿菌作為外源基因表達系統有哪些優缺點
8樓:網友
優勢:全基因組測序,共有4405個開放型閱讀框架 基因轉殖表達系統成熟完善 繁殖迅速、培養簡單、操作方便、遺傳穩定 被美國fda批准為安全的基因工程受體生物。
劣勢:缺乏對真核生物蛋白質的復性功能 缺乏對真核生物蛋白質的修飾加工系統 內源性蛋白酶降解空間構象不正確的異源蛋白 細胞周質內含有種類繁多的內毒素。
9樓:網友
遺傳背景清楚、載體受體系統完備、生長迅速、培養簡單、重組子穩定。
什麼藥治大腸桿菌的,大腸桿菌該用什麼藥治療最佳
一般大腸桿菌感染者多是患有腸胃疾病者有之,且以慢性胃炎居多,也有十二指腸及腸炎等,多用胃三聯殺之,簡單配置為克拉黴素,阿莫西林,奧美拉唑或耐信,服用兩個療程可殺死比菌。大腸桿菌學名escherichia coli,就是一個種,但因為微生物容易變異,所以臨床上或科學研究中專 分離到的大腸桿菌有少許差屬...
為什麼不是所有的大腸桿菌都成功轉入了質粒
影響轉來化效率的因素很多源,主要有 感受態細胞製備的質量 受體菌生長期 大腸桿菌在對數生長期易產生感受態 質粒的大小和構型 所用試劑的純度 接種前菌種的保藏方式 冰浴時間 延長冰浴時間可略微提高轉化率 器皿的清潔度 化合物及無機離子 rb mn 二甲基亞碸能適當提高轉化率 質粒與細胞個數的比例 質粒...
大腸桿菌為什麼常選為宿主菌用於基因工程
第一,大腸桿菌是一種常 見菌種.人們對其細胞形態及生理生化特性已經瞭解比較深入,對於培養基配製與運載體匯入的具體技術等方面也就更容易把握.第二,細菌質粒 遊離於細菌等微生物細胞質中的小型環狀dna分子 是基因工程常用的運載體 與目的基因結合的工具 而大腸桿菌質粒又是最常用的質粒,因為大腸桿菌質粒上有...