1樓：國外旅居日記
在實際情況下， 在做轉殖插入片段的時候已經把有的序列優化了 (例如選擇較常見的密碼子), 以兩個taa來有效終止 (基本上乙個也夠啦). 其他的都已經由你選擇的那個載體決定了。
到了蛋白表達這步， 首先選擇在什麼細胞系裡表達啦。 原核細胞(大腸桿菌吧)一般要試不同的strain (細胞系), 有的是翻譯系統經過優化的( 例如使信使rna更穩定啦， 增加幾個罕見的轉運rna來對應那些罕見的密碼子啦), 有的是細胞裡有輔助蛋白的 (使你要表達的蛋白能準確摺疊). 轉化塗板之後得到很多colony, 一定要試多個不同的轉殖(colony), 因為天知道有的轉殖就是表達得比另乙個好。
另外還有這些變數要去優化： 誘導的時間 (細胞密度， 測od600, 一般在左右為佳), 誘導劑 (例如iptg)的濃度， 蛋白表達的溫度和時間 (經驗證明，溫度真是很重要！)
希望對你有幫助~
2樓：夢穎藍嫣
可以使用高效的啟動子。
以分泌形式表達蛋白。
使用表達系統偏愛的密碼子。
下游有效的終止子。
啟動子和轉錄起始位點的距離要最適。
基因工程問題，真核基因在原核細胞中如何表達
3樓：網友
一、請刪去基因中的內含子。這可以通過將該基因的cdna連線至載體中而解決。
二、所用的表達載體中，你所需要表達的基因必須由宿主菌能夠使用的原核啟動子來啟動。一般商業的原核表達載體均有這類啟動子。
三、如果你需要表達的基因與宿主菌的密碼子偏好有很大的不同，則需要更改這些密碼子一適應宿主菌。
4樓：網友
人胰島素基因在重組前已經把內含子部分剪下掉了，故可在原核細胞中表達。
真核生物的同乙個基因片段可以轉錄為兩種或兩種以上mrna,原因是外顯子與內含子的相對性，
5樓：網友
真核生物的同乙個基因片段，在同一生物體內只能轉錄出一種mrna，但是在不同的生物體內，對該基因片段中的內含子和外顯子的識別是不同的，所以說真核生物的同乙個基因片段可以轉錄為兩種或兩種以上mrna是因為內含子和外顯子的相對性。
乙個基因可以控制多個性狀的形成，比如說白化病、苯丙酮尿症、尿黑酸尿病這些病都可以由多個基因控制，而裡面的乙個基因出問題，可能這幾種病都會患！
6樓：網友
即外顯子與內含子是相對而言的，有些性狀中是外顯子，而在另一性狀中則是內含子。
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