液相色譜進行製備有什麼優點,高效液相色譜法的優缺點

2022-06-13 11:46:23 字數 5140 閱讀 3008

1樓:柒月黑瞳

以液相色譜進行製備時,分離條件溫和,分離檢測中 不會導致試樣被破壞,且易於**原物。

液相色譜分離系統也由兩相——固定相和流動相組成。液相色譜的固定相可以是吸附劑、化學鍵合固定相(或在惰性載體表面塗上一層液膜)、離子交換樹脂或多孔性凝膠;流動相是各種溶劑。被分離混合物由流動相液體推動進入色譜柱。

根據各組分在固定相及流動相中的吸附能力、分配係數、離子交換作用或分子尺寸大小的差異進行分離。色譜分離的實質是樣品分子(溶質)與溶劑(即流動相或洗脫液)以及固定相分子間的作用,作用力的大小,決定色譜過程的保留行為。

根據分離機制不同,液相色譜可分為:液固吸附色譜、液液分配色譜、化合鍵合色譜、離子交換色譜以及分子排阻色譜等型別。

2樓:匿名使用者

走出校門.爺爺看見了,立刻從兜裡摸出一張手帕,讓我在手中握著,使我僵硬的手感到溫暖.緊接著報我坐上了自行車,快速地蹬開了.

雨漸漸小了,陣陣涼風打在我的手上、臉上好似穿進骨肉一般.我趴在爺爺的背上,爺爺的背十分溫暖.只聽見自行車發出的「吱嘎吱嘎」的聲音,而且越來越急促.

一路上,爺爺不停地問我「冷不冷」,告訴我彆著急.終於回到了家中,爺爺馬不停蹄地幫我換衣服,備置飯菜.爸爸、媽媽、奶奶都來照顧我,不一會兒我冰冷的身體漸漸舒緩,髒兮兮的衣服也已換下.

我感到了家的溫暖.在這裡,沒有雨雪風寒,只有親情搭建的火爐在徐徐燃燒著,儘管窗外風雨在呼嘯,但家的溫暖足以融化你心中的

高效液相色譜法的優缺點

3樓:匿名使用者

優點:分離效率高,選擇性好,檢測靈敏度高,操作自動化,應用範圍廣;

與氣相色譜法相比具有的優點:不受試樣的揮發性和熱穩定性限制,應用範圍廣;流動相種類多,可通過流動相的優化達到高的分離效率;一般在啊室溫下分析即可,不需高柱溫。

缺點:分析成本高,液相色譜儀**及日常維護費用貴,分析時間一般比氣相長。

4樓:匿名使用者

lc用於定性,gc用於定量。lc需要天天清洗,gc出現故障才需要

5樓:匿名使用者

這個問題概念比較大,建議你上「色譜世界」**看看。「學習培訓」欄目有非常詳細的介紹。

高效液相色譜與氣相色譜相比有什麼優點

6樓:匿名使用者

液相測定

copy範圍廣:液相色譜儀可檢測物質比較多,配備不同的檢測器,結合衍生實驗可以檢測絕大多數化合物。氣相色譜可檢測的物質只有易揮發物質,尤其是有機物測定有很好的效果。

精密度高:常做實驗就可以知道,液相的精密度判定標準為rsd小於2%,而氣相是10%。說明氣相的實驗誤差很大,無法達到液相的相同標準。

安全:氣相色譜執行時需要升溫,進樣口和檢測器一般都不低於200℃,柱溫箱有時也會高達近200℃;配備fid的氣相還需要氫氣源來維持檢測器火焰燃燒,氫氣源不論是鋼瓶和是發生器都具有一定危險性;配備ecd的氣相,其ecd中具有放射源,使用及處理不當會造成放射源洩漏,產生放射汙染等等。

分離效果好:由於流動介質的性質不同,液相色譜的峰型引數一般較氣相更好,如對稱性、拖尾因子、理論塔板數等等。可以提高分離效果。

7樓:匿名使用者

氣相色譜檢測的樣品需要氣化,範圍比較窄

液相色譜儀的原理是什麼?用來幹什麼?

8樓:匿名使用者

液相色譜儀的原理:

儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數,在兩相中作相對運動時,經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀,資料以圖譜形式列印出來。

主要用於對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱核淋洗劑並以實現分離。應用於生物化學、生物醫學、環境化學、石油化工等部門。

液相色譜儀根據固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(llc)及液-固色譜(lsc)。現代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、訊號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點。

高效液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和資料處理系統。

進樣系統

一般採用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,進樣量是恆定的。這對提高分析樣品的重複性是有益的。

輸液系統

該系統包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l.47~4.4x10pa,流速可調且穩定,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,這對提高解析度、**樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。

分離系統

該系統包括色譜柱、連線管和恆溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時,可在二者之間加一連線管),內徑為2~5mm,由"優質不鏽鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料製成,住內裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質和固定液構成)。

固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或矽膠構成,它們都有惰性(如矽膠表面的矽酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達1000?)和比表面積大的特點,加之其表面經過機械塗漬(與氣相色譜中固定相的製備一樣),或者用化學法偶聯各種基因(如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物。

9樓:我弄丟一個人

液相色譜儀系統是由由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。

液相色譜儀的原理:儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數,在兩相中作相對運動時,經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀,資料就可以以圖譜形式列印出來,以便研究人員分析。

液相色譜儀的用途:

在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來分離新增劑,如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用於石油烴類的組成分析。

用於氨基酸、蛋白質的分析,也適合於某些無機離子(no3-、so42-、cl-等無機陰離子和na+、ca2+、mg2+、k+等無機陽離子)的分離和分析,具有十分重要的作用。

適用於水溶液的體系,又適用於有機溶劑的體系。當所用的洗脫劑為水溶液時,稱為凝膠過濾色譜,其在生物界的應用比較多。

拓展回答:

液相色譜儀的應用:高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的範圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。與試樣預處理技術相配合,hplc所達到的高解析度和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離複雜相體中的微量成分。

隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離hplc成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於hplc具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。

10樓:匿名使用者

液相色譜儀的原理:

液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統等組成,是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而後分析鑑定的儀器。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配係數,在兩相中作相對運動時,經過反覆多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電訊號傳送到記錄儀,資料以圖譜形式列印出來。

應用:高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的範圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。與試樣預處理技術相配合,hplc所達到的高解析度和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離複雜相體中的微量成分。

隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離hplc成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於hplc具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。

液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發展很快如在環境汙染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發烴類,使環境汙染分析得到新的發展。

系統組成及特點:

1、進樣系統

一般採用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作,進樣量是恆定的。這對提高分析樣品的重複性是有益的。

2、輸液系統

該系統包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l.47~4.4x10pa,流速可調且穩定,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,這對提高解析度、**樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存器和梯度儀,可使流動相隨固定相和樣品的性質而改變,包括改變洗脫液的極性、離子強度、ph值,或改用競爭性抑制劑或變性劑等。

這就可使各種物質(即使僅有一個基團的差別或是同分異構體)都能獲得有效分離。

3、分離系統

該系統包括色譜柱、連線管和恆溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時,可在二者之間加一連線管),內徑為2~5mm,由"優質不鏽鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料製成,住內裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質和固定液構成).固定相中的基質是由機械強度高的樹脂或矽膠構成,它們都有惰性(如矽膠表面的矽酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達1000)和比表面積大的特點,加之其表面經過機械塗漬(與氣相色譜中固定相的製備一樣),或者用化學法偶聯各種基因(如磷酸基、季胺基、羥甲基、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物。因此,這類固定相對結構不同的物質有良好的選擇性。

例如,在多孔性矽膠表面偶聯豌豆凝集素(psa)後,就可以把成纖維細胞中的一種糖蛋白分離出來。

另外,固定相基質粒小,柱床極易達到均勻、緻密狀態,極易降低渦流擴散效應。基質粒度小,微孔淺,樣品在微孔區內傳質短。這些對縮小譜頻寬度、提高解析度是有益的。

根據柱效理論分析,基質粒度小,塔板理論數n就越大。這也進一步證明基質粒度小,會提高解析度的道理。

再者,高效液相色譜的恆溫器可使溫度從室溫調到60c,通過改善傳質速度,縮短分析時間,就可增加層析柱的效率。

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