PCR技術中,要反覆高溫處理以使更多的DNA雙鏈解旋嗎

2021-04-18 17:14:03 字數 876 閱讀 4810

1樓:匿名使用者

是的,每個迴圈都需要高溫變性,解開dna雙螺旋。

標準的pcr過程分為三步:

dna變性版

(90℃-96℃):雙權鏈dna模板在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈dna

退火(60℃-65℃):系統溫度降低,引物與dna模板結合,形成區域性雙鏈。

延伸(70℃-75℃):在taq酶(在72℃左右,活性最佳

梯度pcr儀)的作用下,以dntp為原料,從引物的3′端開始以從5′→3′端的方向延伸,合成與模板互補的dna鏈。

每一迴圈經過變性、退火和延伸,dna含量即增加一倍。如圖所示:現在有些pcr因為擴增區很短,即使taq酶活性不是最佳也能在很短的時間內複製完成,因此可以改為兩步法,即退火和延伸同時在60℃-65℃間進行,以減少一次升降溫過程,提高了反應速度。

2樓:匿名使用者

反覆是讓上一波延伸完的雙鏈,成為新的模板,已達到最後的百萬倍

3樓:愛瘋煙火的男孩

這不用,因為處理要一直是高溫,

利用pcr技術擴增目的基因的過程中,需加入(  )a.耐高溫的解旋酶以保證dna雙鏈完全解開b.2種已知核

4樓:允兒

a、pcr技術中,採用高溫使dna解旋,並沒有使用解旋酶,故a錯誤;

b、利用pcr技術擴增dna的過程中,需要2種已知核苷酸序列的引物以保證核苷酸鏈的延伸,故b正確;

c、pcr技術的原理是dna複製,需要4中足量的脫氧核糖核苷酸作為原料,故c錯誤;

d、利用pcr技術擴增dna的過程中,需要一定量的緩衝溶液以維持ph的穩定,因為pcr反應需要在一定的緩衝溶液中才能進行,故d錯誤.

故選b.

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