1樓：_baby大人
陰性對照塗布的應該是沒有轉質粒的空菌吧？
我覺得可能有三個原因：
1，你的amp平板失活，可能是你加抗生素的時候培養基溫度太高。如果這樣，你的平板就相當於是無抗的。
2，無菌操作失誤，帶入了其他有抗性的雜菌。
3，你的空菌被轉入質粒的菌汙染了。或者你的菌本身有汙染。
鑑定的方法很簡單，重點是你的陰性對照菌。做個菌落pcr看有沒有目的帶，或者直接挑單菌落用amp培養基（要保證不失活）搖菌過夜看長不長。
質粒dna的轉化實驗中在含amp的選擇性培養基上實驗組和陰性對照都沒有菌落出現，這說明什麼？原因是什麼
2樓：洛洛雪染
供體菌相應位點的染色體沒有交換到受體菌上，而且受體菌本身不能被該選擇性培養基選擇。
你可以再做一組供體菌的對照試驗，看看能不能生長。
這種轉化本身發生頻率就很低，樣本一定要多。
質粒轉化的陽性和陰性對照是什麼
3樓：
陽性對照：
確定連線產物已經轉化到感受態細胞中 將感受態細胞進行鋪板陰性對照：僅僅將感受態細胞進行鋪板
這麼做的目的是：如果最後陰性對照的盤子都有菌落生長了，那這批結果必然不可信
如果陽性對照長而目的盤子沒長，那就說明是轉化手法出了問題如果陽性對照都沒長，那就說明這批感受態細胞有問題
4樓：兵兵王
陽性對照：用質粒轉化感受態細胞
陰性對照：用水溶液代替質粒dna進行相同的轉化操作。目的是為了表明陽性克隆是因為質粒轉化而來的，而不是因為菌株自身抗性。
（如果陰性對照也有菌落長出，說明感受態細胞本身有了抗性，質粒轉化出來的克隆會有假陽性）
目的dna與載體連線後轉化感受態細胞，但在固體培養基上未能長出菌落，試分析出現該情況的可能原因。 10
5樓：匿名使用者
沒有成功轉化
選錯了篩選培養基
感受態細胞在轉化前就已經失活了
「轉化子」的概念什麼？？？？？？？ 20
6樓：嫋嫋新月
應用酶學的
方法，抄在體外將各種**襲的遺傳物質—bai
—同源或異源、原du核或真核、天然或人工的zhidna與載體dna相結合成一dao具有自我複製能力的dna分子——複製子，繼而通過轉化或轉染宿主細胞、篩選出含有目的基因的轉化子細胞，再進行擴增、提取獲得大量同一dna分子，即dna克隆。
dna的轉化實驗中,為什麼轉化成功的細胞能夠在選擇性培養基上生長？
7樓：匿名使用者
因為質粒是帶抗生素的抗性基因，如果轉入了細菌，培養基加的抗生素顯然對這些細菌就不起作用了，細菌就會生長起來。如果細菌裡面沒有轉入這個質粒，那就會給抗生素殺死。
8樓：匿名使用者
供體菌相應位點的染色體沒有交換到受體菌上，而且受體菌本身不能被該選擇性培養基選擇。
你可以再做一組供體菌的對照試驗，看看能不能生長。
這種轉化本身發生頻率就很低，樣本一定要多。
9樓：匿名使用者
選擇性培養基 顧名思義 其作用是選擇我們需要的細胞或細菌等 針對我們需要的細內胞或菌 在培養基中加入了容相應的物質 而這些物質只有轉化成功了的細胞或菌才能分解利用 滿足它們的生存 而沒有轉化成功的細胞或菌不能分解培養基中相應的物質 其生長受到了限制
在含氨苄青黴素的培養基中培養轉入質粒的菌株 菌落周圍會出現一圈小菌落
10樓：_baby大人
樓上bai別誤導人。菌株死亡會du出現小菌落？？- - 能長出菌zhi落，就說
dao明有活力。
在抗性平板上
專，大菌落周圍的小菌屬落，一般是由於有抗性的菌（也就是轉化成功的菌），將抗生素代謝掉之後，使得其周圍抗生素濃度下降，從而使其他雜菌有機會生長。一般稱它為「衛星菌落」。
你做一個菌落pcr，就知道是不是雜菌了。或者直接挑那些衛星菌，搖菌塗抗性平板驗證下。
11樓：語義嫣然
正常bai情況下，在含有氨du
苄青黴素的培養基中細菌是不
zhi能生dao存的，也就是說不會出現內
菌落。容
在基因工程中，常用含有標記基因(常常是含有抗性基因的質粒，例如含有抗氨卞青黴素、抗四環素基因的質粒)的質粒作為運載體。
將這些含有標記基因的質粒匯入受體細胞後，受體細胞往往也回具有抵抗氨卞青黴素或者四環素的能力，故這些匯入了重組質粒的菌株在含有氨卞青黴素的培養基上培養，會出現菌落。
至於菌落周圍出現一圈小菌落，可能是中間有一些不能抵抗氨卞青黴素的菌株死亡所導致。
在觀察DNA與RNA分佈的實驗中，為什麼要用緩衝溶液配製來控
dna和rna限酸性 給這兩個物種用的兩種染料都是現鹼性的 方便染色 我們一般用的是碳酸氫鈉 緩衝液 如果ph現酸性是比較難染色的 或者染色效果不好 不方便觀察 至於ph變大 我的老師沒有具體的說過 但是我認為 這可能也是為了防止dna或rna中的外部磷酸發生反應而水解 就像dna在氫氧化鈉中會水解...
一道實驗設計，設計藥物質粒中的表達，從目的基因篩選到蛋白質檢測
過程有點小複雜下面是我回答別人的問題的答案，你可以參考 1.得到目的基因 設計引物 引物上帶有酶切位點 進行pcr，膠 酶切，再膠 得到帶有粘性末端的目的基因 將目的片段連線到具有相同粘性末端的pet載體上 2 得到目的蛋白 將連線好的帶有目的片段的載體轉入到dh5 菌系中，將菌塗布與相應的抗性lb...
為了提高感受態細胞的轉化率,實驗中需要考慮哪些因素
影響感受態細胞bai轉化du效率的因素及zhi實際操作過程中應注意的事dao項 1.細菌的內生長狀態 實驗中應容密切注視細菌的生長狀態和密度,儘量使用對數生長期的細胞 一般通過檢測od600來控制。dh5 菌株 od600為 0.5 時細胞密度是 5 107 ml 2.所有操作均應在無菌條件和冰上進...