流式細胞儀檢測細胞週期DNA含量結果圖怎樣分析和說明

2021-03-24 03:26:11 字數 2373 閱讀 1245

1樓:匿名使用者

流式細胞儀檢測細胞週期dna含量結果圖怎樣分析和說明已經做完流式,看到結果卻不知該怎樣分析了。我用的是annexinv-fitc 凋亡試劑盒 ,annexinv/pi雙染檢測細胞凋亡。請教各位,凋亡散點圖中第1,2,4象限到底分別代表什麼細胞?

手裡的資料說法都不相同。試劑盒說明書:1代表細胞收集過程中機械性損傷的細胞,2 代表繼發性壞死細胞,4代表凋亡細胞。

有資料說:1代表壞死細胞,2代表晚期凋亡細胞,4代表早期凋亡細胞。我就不明白了,既然是凋亡,就算是晚期,細胞膜也會破壞?

還有的認為,2象限代表晚期凋亡和繼發性壞死的細胞。

我用的是美國beckman-coulter公司試劑盒,它的說明說上就是這麼寫的:

quadrant 3:viable cellsquadrant 4:apoptotic cellsquadrant 2:secondary necrotic cells

流式細胞儀測細胞週期圖怎樣分析

2樓:瀟灑的熱心網友

(1)細胞

培養bai

取對數生長du

期的細胞,按1x106個/ml以1ml體積zhi接種dao於6孔板內

。培養24h後,加入版不權同濃度樣品。在37 ℃、5 % 的co2恆溫箱中培養24h後終止。

(2)細胞固定

胰酶消化並離心收集細胞(800rpm/min),棄上清,用預冷pbs洗細胞兩次,加入預冷70%乙醇, -20℃固定儲存。

(3) 細胞染色

離心收集細胞(800rpm/min),以1ml的pbs洗細胞一次,加入500ulpbs含50ug/ml溴化乙錠(pi),100ug/ml rnase a, 4℃避光孵育20分鐘。

(4)檢測

以標準程式用流式細胞儀檢測,汞激發波長488nm,計數8千個細胞,結果用軟體winmdi version 2.9分析。

流式細胞儀結果圖如何看

3樓:匿名使用者

流式細胞儀檢測的都是相對熒光強度,因此一般都是用來比較兩個或以上樣本的熒光強度的差異。而熒光強度則是由熒游標記抗體或者其他熒光染料根據不同目的來選用的。

你可以貼一組具體的圖來,我可以給你一些指導。

流式細胞儀檢測細胞週期圖怎麼看

4樓:匿名使用者

這個要根據是dna單染還是dna+核苷酸模擬物雙染來區別。你的圖呢?

如何看流式細胞週期結果圖?

5樓:sks精品本本

g1期 s期 g2期各佔的比例啊

流式細胞週期結果 怎麼分析

6樓:匿名使用者

細胞週期至少有兩種做法,最常見的如下圖分析:

這個是brdu和7-aad方法檢測細胞週期。紅色的gate就是g1期,綠色的就是s期,橙色的就是g2/m期。brdu, pi, 或者edu方法和這個一樣分析

如果單用pi等dna染料染色,需要專業軟體來分析計算了。

比如這個圖,是dna染料單染,其中粉色部分是g1期,黃色部分是s期,綠色部分是g2/m期。中間的分佈一般是通過flowjo這樣的軟體計算自動生成的。

請教細胞週期分析原理和分析結果解釋

流式細胞儀圖怎麼看

7樓:匿名使用者

要看圖具體說,pi單染的是壞死細胞及晚期凋亡細胞,annexin v-fitc單染是我們需要的凋亡細胞,雙染是機械性壞死,未染細胞就是正常細胞了。

8樓:鎏彩棲霞

二維點圖以雙引數顯示結果,每個點表示一個或多個細胞。圖5-6為陰性對照圖,用於設定陰性對照邊界,全圖劃分為四個象限,以區分陰性細胞、單陽性細胞以及雙陽性細胞。左下象限(ll)為雙陰性細胞,左上象限(ul)為y軸陽性細胞(cd19 pe),左下象限(lr)為x軸陽性細胞(cd3 fitc),右上象限(ur)為雙陽性細胞(cd19+/cd3+)。

流式細胞儀檢測細胞週期dna含量結果圖怎樣分析和說明

9樓:匿名使用者

看你用什麼染色了,如果只是pi的話,見圖1。

如果用annexin v-fitc和碘化丙啶染色的話,正常的活細胞不被annexin v-fitc和碘化丙啶染色(圖2左下角);凋亡早期的細胞僅被annexin v-fitc染色,碘化丙啶染色呈陰性(圖2右下角);壞死細胞和凋亡晚期的細胞可以同時被annexin v-fitc和碘化丙啶染色(圖2右上角)。

10樓:小笨獨豬

採納的答案回答的是流式測凋亡,而不是流式測細胞週期的dna含量...

流式細胞儀法能檢測哪些病症,我用流式細胞儀檢測了CD4,CD8,圖怎麼看,各象限表示什麼

只要有特異性的細胞可以被標記 細胞群,或者特異性的細胞 就可以用流式細胞儀。比如白血病,骨髓瘤,艾滋病 的監測 看cd4細胞的水平 等等。我用流式細胞儀檢測了cd4,cd8,圖怎麼看,各象限表示什麼 你的圖呢,先貼一下圖吧,不然只能猜了。檢測cd4和cd8,應該還要同時染色cd3.先選中cd3陽性的...

請問流式細胞儀檢測細胞凋亡的原理是什麼

一 原理 在正常細胞中,磷脂醯絲氨酸 ps 只分布在細胞膜脂質雙層的內側,而在細胞凋亡早期,細胞膜中的磷脂醯絲氨酸 ps 由脂膜內側翻向外側。annexin v是一種分子量為35 36kd的ca2 依賴性磷脂結合蛋白,與磷脂醯絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側暴露的磷脂醯絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜...

請教怎麼運用流式細胞儀檢測細胞內鈣離子

細胞可以用一些鈣離子濃度敏感的熒光染料染色。然後可以比較不同組或者同一樣本在不同時間的熒光變化,從而得到相對鈣離子濃度的變化。怎麼用流式細胞儀檢測hela細胞內的ca2 檢測細胞內的鈣離子的變化,可以用鈣敏感的熒光染料。比如下圖的這個結果,就是細胞用indo 1鈣敏感染料先染色,然後刺激,可以看到熒...