請教怎麼運用流式細胞儀檢測細胞內鈣離子

2021-03-12 18:15:19 字數 624 閱讀 9936

1樓:匿名使用者

細胞可以用一些鈣離子濃度敏感的熒光染料染色。然後可以比較不同組或者同一樣本在不同時間的熒光變化,從而得到相對鈣離子濃度的變化。

怎麼用流式細胞儀檢測hela細胞內的ca2+

2樓:匿名使用者

檢測細胞內的鈣離子的變化,可以用鈣敏感的熒光染料。比如下圖的這個結果,就是細胞用indo-1鈣敏感染料先染色,然後刺激,可以看到熒光強度變化

請教流式檢測細胞熒游標記前的處理

3樓:匿名使用者

首先,你要準備

復的是制單細胞懸液。**於體液的樣本,比如血液,腦脊液等等,這個好辦。去除紅細胞後就可以直接染色了。

而貼壁培養,或者**於器官(比如脾臟,淋巴結),或者組織(比如腫瘤)的細胞,需要通過機械加上酶消化等方法來分離細胞。所採用的方法要根據不同樣本各自優化。目的就是儘可能產生多的活細胞,同時不破壞細胞表面的蛋白,以免影響抗體的識別。

得到的細胞懸液需要過濾,一般使用40-70微米孔徑的濾網,以除去團塊和雜物。染色前再根據實驗要求進行封閉。所使用的抗體濃度需要經過系列稀釋,計算染色指數(stain index)而得到最佳工作濃度

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