提取基因組dna中運用了dna的哪些性質

2025-07-26 11:20:57 字數 2096 閱讀 3514

從全血中提取基因組dna用到各試劑的作用。急急急

1樓:

全血基因組dna提取試劑盒(離心柱型)作用原來具體是這樣的:獨特的結合液/蛋白酶k迅速裂解細胞和滅活細胞核心酸酶,然後基因組dna在高離序鹽狀態下選擇性吸附於離心柱內矽基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,抑制物去除液和漂洗液將細胞代謝物,蛋白等雜質去除,最後低鹽的洗脫緩衝液將純淨基因組dna從矽基質膜上洗脫。

試劑盒特點:

不需要使用有毒的苯酚等試劑,也不需要乙醇沉澱等步驟。

快速,簡捷,單個樣品操作一般可在20分鐘內完成。

多次柱漂洗確保高純度,典型的產量200μl全血可提取出3-6μg,純度達,長度可達30kb-50kb,可直接用於pcr,southern-blot和各種酶切反應。

從十幾個配方中優選出的紅細胞裂解液配方,裂解快速完全,客戶可根據需要選擇購買。

說明書中針對實驗過程出現的疑難做出了詳細的解答,幫助你解決實驗過程中遇到的問題(如標本中含有血凝塊、紅細胞裂解不完全、dna產量低、dna下游酶切不能切開或者酶切不完全、dna長度小於15kb、a260吸光值異常偏高、洗脫下來的dna溶液還帶有輕微的顏色等).

細胞基因組dna的提取

2樓:網友

dna降解無非兩個原因:

1.細胞內dna酶作用於gdna,你的材料在放入提取液前沒有在細胞破碎的情況下放久吧?

2.機械力作用:有很劇烈的長時間渦旋嗎?或者之類的。但一般也不會有事。

我們實驗室一般使用biog dna blood isolate kit提取全血樣本中的dna,然後qubit測提取到的dna濃度。

3樓:匿名使用者

首先嚴格說不是dna的降解,是dna被打斷後形成的片段,因為一般dna都很長,在操作過程中容易受外力的作用而斷裂,形成片段,這是正常現象,提取中無法避免,只能儘量減少;

如果是降解的話,會形成彌散形的條帶,條帶區分不明顯;

操作中注意用力要柔和,不要用力的搖晃和吹打等,所使用的槍頭最好提前用剪刀斜著剪一下,使槍頭孔徑變大,可以保證抽吸的時候減少對dna的剪下力;

注意加入rna酶,降解rna;

基因組dna製備過程中提取緩衝液有哪些成分,作用是什麼

4樓:鞠翠花喻書

主要成分是:nacl,tris-hcl(ph=8),edta(ph=8),,tris-hcl主要是調節溶液的ph,維持一定的離子濃度。edta主要是二價金屬離子的螯合劑,使影響dna的dna酶中的鈣離子和鎂離子和edta結合,使酶失去活性,有利於提取完整dna;sds主要是和蛋白質結合,使其變形沉澱,從而利於dna的提取,減少和清除帶白質雜質!

提取的基因組dna有哪些方面的用途?

5樓:忻素芹回錦

dna提取主要是ctab方法,其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法、鹼裂解法。生物方式:

酶法。根據核酸分離純化方式的不同有;矽質材料、陰離子交換樹脂等。

基因組dna製備過程中提取緩衝液有哪些成分,作用是什麼?

6樓:匿名使用者

ste:破壞細胞膜、核膜,分散好的真核生物組織、細胞在含sds和蛋白酶k的溶液中消化分解蛋白質。

sds:可使組織蛋白與dna分子分離。

edta:能抑制細胞中dnase的活性,使dna分子完整地以可溶形式存在於溶液中。

酚:抽提除去蛋白質。

氯仿:除去dna溶液中微量酚的汙染。

異戊醇:可減少蛋白質變性操作過程中產生氣泡乙醇:dna可經乙醇沉澱。

rnase:除去rna,進一步純化dna,獲得高純度dna

7樓:網友

主要成分是:nacl,tris-hcl(ph=8),edta(ph=8),,tris-hcl主要是調節溶液的ph,維持一定的離子濃度。edta主要是二價金屬離子的螯合劑,使影響dna的dna酶中的鈣離子和鎂離子和edta結合,使酶失去活性,有利於提取完整dna;sds主要是和蛋白質結合,使其變形沉澱,從而利於dna的提取,減少和清除帶白質雜質!

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