1樓：化晴子
你要注意，並不是「將一群質粒放在卡那黴素培養基中培養」，而是將攜帶有宿主菌放在卡那黴素培養基中培養。如果宿主菌帶有質粒，那麼就能夠存活。但是，是否攜帶有插入外源片段的重組載體，但靠抗性篩選是不夠的，還要靠其他手段篩選，比如藍白斑篩選。
2樓：網友
這次篩選就是為了選出含有標記基因的質粒的細胞。
還要再篩選一次選出有目的基因的質粒的細胞。
要經過兩次篩選過程，你說的只是第一次。
利用質粒抗生素篩選標記進行轉化子篩選的機理
3樓：網友
大多數質粒載體都是用抗菌素抗性標記，包括氨苄青黴素抗性（ampr）、卡那黴素抗性（kanr）、四環素抗性（tetr）、鏈黴素抗性（strr）和氯黴素抗性（cmlr））等。
i）氨苄青黴素（ampicillin，amp）是青黴素的衍生物，通過干擾細菌細胞壁合成的末端反應，殺死生長的細菌。細菌質粒amp
r基因編碼b-內醯胺酶，特異地切割氨苄青黴素的b-內醯胺環。
ii）氯黴素（chloramphenicol，cml）通過與50s核糖體亞基結合，干擾細胞蛋白質的合成並阻止肽鍵的形成。殺死生長的細菌。細菌抗性原理是cml
r編碼乙醯轉移酶，特異地使氯黴素乙醯化而失活。
iii）卡那黴素（kanamycin，kan）通過與70s核糖體結合，導致mrna發生錯讀。殺死細菌。而kan r
編碼的氨基糖苷磷酸轉移酶，對卡那黴素進行修飾，阻斷其與核糖體結合作用。
iv）鏈黴素（streptomycin，str）通過與30s核糖體亞基結合，導致mrna錯譯。殺死細菌。str
r編碼一種氨基糖苷磷酸轉移酶對鏈黴素進行修飾，阻斷其與核糖體30s亞基結合作用。
v）四環素（tetracycline，tet）通過於30s核糖體亞基結合，干擾細胞蛋白質的合成並阻止肽鍵的形成。殺死生長的細菌。tet r 編碼特異性蛋白質，對細菌的膜結構進行修飾，組止四環素通過細胞膜進入細菌細胞內。
抗生素抗性篩選原理是：不帶有抗菌素抗性基因的受體菌不能在含有抗菌素的培養基（選擇培養基）中生長。當帶有抗菌素抗性基因的載體進入受體菌後，受體菌才能生長。
抗性基因在質粒上，怎樣起篩選作用
4樓：匿名使用者
抗性基因或標記基因在質粒上是為了檢驗質粒是否被轉入菌體中。
如果你的質粒是已經構建好，而且鑑定正確的，沒有空載體質粒，那麼，當你轉化後，在篩選平板上轉化（因為轉化不是100%的效率，有些菌是沒有質粒轉入的）,只有轉入了該質粒的菌才能長起來，也就意味著這菌是帶有你的目的基因。另外，抗性基因和標記基因（如營養缺陷基因）給予菌體以選擇壓力，有利於質粒在菌體內的大量擴增。
另一種情況，比如你做連線實驗，把目的基因片段和酶切質粒連線，這時，連線效率更不會是100%,當你把連線產物轉入感受態細菌，只要轉入了該質粒（無論是空載體還是陽性載體）,菌都能長起來，沒轉入的就長不起來，起到第一步篩選。要篩選你的陽性轉殖，還需進一步檢驗，比如pcr或者提質粒酶切。
純屬手打，歡迎繼續討論，祝愉快！
如何準確篩選已經匯入目的基因的質粒
5樓：血刺流氓俑
用目的基因的反義基因進行分子雜交是最容易的方法，能夠很快檢出目的基因。
為什麼質粒中含有抗生素a抗性基因就用抗生素a篩選？
6樓：prince丶空空
植物自身沒有抵抗抗生素的基因。質粒中的基因重組到一些植物細胞中。一些沒有重組到細胞中。
沒有重組到抗性基因的細胞不具有抗性。所以用抗生素施加到所有細胞上的時候。重組的細胞可以繼續正常存在。
沒有重組的細胞會被淘汰。
7樓：網友
具有抗生素a抗性基因質粒對抗生素a具有抗性，轉化此質粒成功的細胞就具有對抗生素a的抗性，其他雜菌對加入抗生素a的培養基不具有抗性，只有轉化成功的細胞可以生長，所以質粒中含有抗生素a抗性基因就用抗生素a篩選。
藍白斑篩選重組質粒實驗中為什麼用iptg做為誘導物
8樓：刀劍信譽
iptg是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質。基於這個特性，當puc系列的載體dna（或其他帶有lacz 基因載體dna）以lacz 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用m13噬菌體的載體dna進行轉染時，如果在平板培養基中加入x–gal和iptg，由於β–半乳糖苷酶的α–互補性，可以根據是否呈現白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。此外，它還可以作為具有lac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。
乳糖不是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質，半乳糖才是。
關於excel篩選問題
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