1樓：匿名使用者
t克隆的原理是基於常規pcr反應中所使用taq聚合酶能夠在pcr產物的3‘末端非特異性新增一個a,這樣實際上常規pcr產物都含有3端突出一個a的粘性末端.基於這個原理,常規的線性t－克隆載體（puc18和puc19等）在其3’末端新增一個t,這樣的載體能夠和任何pcr產物進行連線克隆,並不需要新增任何特異性的粘性末端位點.這個就是t克隆的原理了.
分析原因可能有： 1、t載體連線有問題，重新調整目的片段和t載體的比例，重新連線。 2、pcr某種試劑出問題了，以前有個師姐就是這樣，怎麼也擴不出來，讓別人帶樣擴出來了，原來是taq 酶出問題了，你也可以確定一下。
2樓：潛淑敏熊壬
關鍵是這個粘性末端帶的是什麼。因為t
載體的末端是突出的t。如果直接是pcr產物，需要考慮，用taq酶擴增的片段可以直接連，如果是高保真酶擴增的片段，需要用taq酶加a尾，大約30min左右。
如果是已經經過酶切的片段，確實要補平加a。如果是這樣，為什麼不直接去連目標載體呢？
最近遇到目的片段與t載體進行連線，目的片段近2000bp，是不是太長了，連線效率會降低，有沒有什麼好辦法？
3樓：匿名使用者
你確定p出來了？ 這個和長度沒有多大關係的 做了幾次呢
聊齋志異夢狼的習題的答案，《聊齋志異》題目的含義
其一有屠人貨肉歸，日已暮，欻 x 忽然 一狼來，瞰擔上肉，似甚垂涎，隨尾行數裡。屠懼，示之以刃，狼 少卻 及走，狼 又從之。屠思狼所欲肉者，不如懸諸樹而 明 早取之。遂鉤肉，翹足掛樹間，示以空擔。狼乃止。屠歸。昧爽 拂曉 往取肉，遙望樹上懸巨物，似人縊死狀，大駭。逡巡 疑慮徘徊 近視，則死狼也。仰首...
優景物描寫，名著片段，能體現作者心情的和植物類，謝謝
風把我推著往前奔跑，將心中的煩惱都拋向那呼嘯而過 沒有窮盡的氣流，我心專裡反倒有一種狂亂的喜屬悅。走完月桂樹小徑，我迎面看到了那棵慄樹的殘骸。她依舊站立在那兒，卻已變得顏色焦黑，慘遭撕裂。樹幹從中間被劈開，可怕的張著大口，但裂開的兩半並沒有完全脫開，因為堅實的樹基仍然使底部連線著。雖然共同的生命體已...
ing形式的非謂語動詞短語能表目的嗎
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