dna測序原理及方法DNA測序原理及方法

2021-03-05 09:21:30 字數 4214 閱讀 5206

1樓:北京索萊寶科技****

dna測序的測序原理:

dna測序是指分析特定dn**段的鹼基序列,也就是腺嘌呤(a)、胸腺嘧啶(t)、胞嘧啶(c)與鳥嘌呤的(g)排列方式。快速的dna測序方法的出現極大地推動了生物學和醫學的研究和發現。

其原理是化學試劑處理末段dn**段,造成鹼基的特異性切割,產生一組具有各種不同長度的dna鏈的反應混合物,經凝膠電泳分離。化學切割反應:包括鹼基的修飾修飾的鹼基從其糖環上轉移出去在失去鹼基的糖環處dna斷裂。

另一個原理是利用一種dna聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成,每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dntp),並混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddntp)。

由於ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基團,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在g、a、t或c處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dntps和ddntps的相對濃度可以調整,使反應得到一組長几百至幾千鹼基的鏈終止產物。

它們具有共同的起始點,但終止在不同的的核苷酸上,可通過高解析度變性凝膠電泳分離大小不同的片段,凝膠處理後可用x-光膠片放射自顯影或非同位素標記進行檢測。

2樓:匿名使用者

給個比較容易理解的也比較專業的**

開開眼界吧

dna測序基本原理及流程是什麼?

3樓:聽風

pcr迴圈測序法是將pcr擴增和核酸序列分析技術相結合,從而形成的一種測定核苷酸序列的研究方法,也稱作線性擴增測序.該方法採用pcr儀加熱使dna模板變性,在taqdna聚合酶作用下,以溫度迴圈模式在模板上進行多輪的雙脫氧核苷酸測序反應,線性擴增標記的dna分子.

pcr迴圈測序法與以往的測序方法相比,其優點在於:大大減少所需的模板量;能提高測序反應產生的訊號,降低了操作的複雜性,且聚合酶的用量減少;可在小量製備的模板上進行篩選反應;高溫下進行的測序反應使dna聚合酶催化的聚合反應能夠通過模板二級結構的區域;雙鏈閉環dna可以直接作為反應模板應用,不用作預先鹼變性處理.由於pcr迴圈測序法能夠簡單、快速地檢測特定序列,因此, pcr迴圈測序法在核酸序列分析研究中受到廣泛的重視.

dna測序的測序原理是什麼?

4樓:北京索萊寶科技****

dna測序是指分析特定dn**段的鹼基序列,也就是腺嘌呤(a)、胸腺嘧啶(t)、胞嘧啶(c)與鳥嘌呤的(g)排列方式。快速的dna測序方法的出現極大地推動了生物學和醫學的研究和發現。

其原理是化學試劑處理末段dn**段,造成鹼基的特異性切割,產生一組具有各種不同長度的dna鏈的反應混合物,經凝膠電泳分離。化學切割反應:包括鹼基的修飾修飾的鹼基從其糖環上轉移出去在失去鹼基的糖環處dna斷裂。

另一個原理是利用一種dna聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成,每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dntp),並混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddntp)。

由於ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基團,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在g、a、t或c處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dntps和ddntps的相對濃度可以調整,使反應得到一組長几百至幾千鹼基的鏈終止產物。

它們具有共同的起始點,但終止在不同的的核苷酸上,可通過高解析度變性凝膠電泳分離大小不同的片段,凝膠處理後可用x-光膠片放射自顯影或非同位素標記進行檢測。

dna測序技術是什麼?

5樓:廣西師範大學出版社

dna的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用於測序的技術主要有sanger等(1977)發明的雙脫氧鏈末端終止法與gilbert(1977)發明的化學降解法。這兩種方法在原理上差異很大,但都是根據核苷酸在某一固定的點開始,隨機在某一個特定的鹼基處終止,產生a,t,c,g四組不同長度的一系列核苷酸,然後在尿素變性的page膠上電泳進行檢測,從而獲得dna序列。

目前sanger測序法得到了廣泛的應用。

dna測序的測序原理

6樓:手機使用者

就是利用一種dna聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成,每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dntp),並混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddntp)。

由於ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基團,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在g、a、t或c處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dntps和ddntps的相對濃度可以調整,使反應得到一組長几百至幾千鹼基的鏈終止產物。

它們具有共同的起始點,但終止在不同的的核苷酸上,可通過高解析度變性凝膠電泳分離大小不同的片段,凝膠處理後可用x-光膠片放射自顯影或非同位素標記進行檢測。

7樓:生物之家

通過使用鏈

終止劑—類似於正常dntp的2』,3』-雙脫氧核苷三磷酸(ddntp),將延伸的dna鏈特異性地終止。其反應體系也包括單鏈模板、引物、4種dntp和dna聚合酶。共分四組,每組按一定比例加入一種 (ddntp),它能隨機滲入合成的dna鏈,一旦滲入合成即終止,於是各種不同大小片段的末端核苷酸必定為該種核苷酸,可以從放射自顯影帶上直接閱讀dna的核苷酸序列。

8樓:北京索萊寶科技****

dna測序是指分析特定dn**段的鹼基序列,也就是腺嘌呤(a)、胸腺嘧啶(t)、胞嘧啶(c)與鳥嘌呤的(g)排列方式。快速的dna測序方法的出現極大地推動了生物學和醫學的研究和發現。

其原理是化學試劑處理末段dn**段,造成鹼基的特異性切割,產生一組具有各種不同長度的dna鏈的反應混合物,經凝膠電泳分離。化學切割反應:包括鹼基的修飾修飾的鹼基從其糖環上轉移出去在失去鹼基的糖環處dna斷裂。

另一個原理是利用一種dna聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成,每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dntp),並混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddntp)。

由於ddntp缺乏延伸所需要的3-oh基團,使延長的寡聚核苷酸選擇性地在g、a、t或c處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dntps和ddntps的相對濃度可以調整,使反應得到一組長几百至幾千鹼基的鏈終止產物。

它們具有共同的起始點,但終止在不同的的核苷酸上,可通過高解析度變性凝膠電泳分離大小不同的片段,凝膠處理後可用x-光膠片放射自顯影或非同位素標記進行檢測。

dna測序的原理?基因組測序的原理?

9樓:匿名使用者

我認為有的。

dna序列測定分手工測序和自動測序,手工測序包括sanger雙脫氧鏈終止法和maxam-gilbert化學降解法。自動化測序實際上已成為當今dna序列分析的主流。自動化測序是在sanger法基礎上發展而來的。

dna測序的原理,要答 maxam-gilbert化學降解法、sanger雙脫氧鏈終止法和現在發展起來的焦磷酸化測序的原理。

如果說現在最常用的測序原理,應答自動化測序:採用毛細管電泳技術取代傳統的聚丙烯醯胺平板電泳,應用該公司專利的四色熒光染料標記的ddntp(標記終止物法),因此通過單引物pcr測序反應,生成的pcr產物則是相差1個鹼基的3'末端為4種不同熒光染料的單鏈dna混合物,使得四種熒光染料的測序pcr產物可在一根毛細管內電泳,從而避免了泳道間遷移率差異的影響,大大提高了測序的精確度。由於分子大小不同,在毛細管電泳中的遷移率也不同,當其通過毛細管讀數視窗段時,鐳射檢測器視窗中的ccd(charge-coupled device)攝影機檢測器就可對熒光分子逐個進行檢測,激發的熒光經光柵分光,以區分代表不同鹼基資訊的不同顏色的熒光,並在ccd攝影機上同步成像,分析軟體可自動將不同熒光轉變為dna序列,從而達到dna測序的目的。

基因組測序的原理:則涉及到樣品的製備、大規模的測序,以及序列分析等

參見

第二代dna測序技術的基本原理

10樓:重量

illumina/solexa genome analyzer測序的基本原理是邊合成邊測序。在sanger等測序方法的基礎上,通過技術創新,用不同顏色的熒游標記四種不同的dntp,當dna聚合酶合成互補鏈時,每新增一種dntp就會釋放出不同的熒光,根據捕捉的熒光訊號並經過特定的計算機軟體處理,從而獲得待測dna的序列資訊。

基因檢測的步驟是什麼,DNA測序基本原理及流程是什麼?

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請問第二代DNA甲基化測序使用什麼測序儀具體原理是什麼呢

hieseq,原理 hiseq 2000的測序原理和genome analyzer相同,採用穩定的可逆終止法邊合成邊測序技術。該技術使用4種含有末端阻斷基團和不同熒光訊號的鹼基進行模板互補鏈的合成,不僅確保了測序的高精確性和高順序性,而且排除了由重複序列和同聚物導致的測序錯誤。dna甲基化全基因組測...

DNA序列測序拼接用什麼軟體好,什麼是高通量測序序列拼接與組裝的軟體

你是什麼測序?一代?二代?三代?一代有 cp3等 二代有 velvet abyss soapdenovo allpaths等 三代就不知道了 第三複代測序技術則是基於奈米制孔的單bai分子讀取技術,全基因組du的測序zhi以及rna seq測序有dna測序和rna測序,dao之前比較早的測序是以晶片...