1樓:淺淺井然
應該是保持內的滲透壓,保持細胞的正常形態,因為na和cl是細胞物質運輸的重要離子
2樓:匿名使用者
應該是加cacl2吧 為的是增加農桿菌細胞壁的通透性
農桿菌感受態的製備為什麼要冰浴
3樓:匿名使用者
樓上別扯了,那是為了讓細胞膜流動性降低,利於dna的結合,同時使細胞暫停生長,維持在對數生長期的高活性!!
4樓:匿名使用者
使它的細胞壁變薄,易於質粒的匯入
5樓:瀧之桃閩睿
你好!使它的細胞壁變薄,易於質粒的匯入
如果對你有幫助,望採納。
農桿菌感受態細胞用什麼方法進行製備?
6樓:匿名使用者
1.挑取bai少許農桿菌lba4404,接種於du5ml lb液體培養基 (含50mg/l str)中,28°C、zhi200r/mim培養dao過夜。
內2.取2ml培養物於
容lb液體培養基 (含50mg/l str) 中繼續培養,直至od800 為0.5左右。
3.將培養物置冰浴中30min,4°C、5000r/min、離心5min,棄去上清液。
4.用10ml冷的0.1mol/l nacl懸浮菌液。
5.4°C、5000r/min,離心5min,棄去上清液。
6.用1ml冷的cacl2 (20mmol/l)懸浮,分裝成50μl/管,液氮中冷凍後至-80°C儲存。
生物幫上面有這方面的介紹, http://****bio1000.
***/zt/protein/225128.html 限制性內切酶,限制性酶切位點,限制酶,dna聚合酶,rna聚合酶,連線酶,修飾酶,核糖核酸酶,dna連線酶作用,限制性內切酶作用,限制性內切酶原理。
凍融法制備農桿菌感受態細胞,並且轉化質粒相關問題。
7樓:佰草集
實驗結果
不能肯定來的說明結果是成功源
的,做bai實驗的陰性對照也很du重要,陰性zhi對照必須做出陰性結果。如樓dao下的網友所說,可能是你的感受態菌被質粒汙染了。現在我回答一下你的 追問吧:
「未轉化質粒的感受態細胞在同樣的lb上塗板也長出單菌落」,那麼這個長出的單菌落你有沒有做菌落pcr的鑑定?如果你沒有做菌落pcr的鑑定,還有一種可能就是你的板子上的抗生素濃度不夠,導致長出了菌,這個菌到底含不含有你的目的質粒,要做pcr鑑定,不要光看菌落長出與否。建議你把板子的抗生素濃度提高,同時看看未轉化質粒的感受態細胞在同樣的lb上塗板也長出的單菌落的pcr鑑定結果,從而判斷是否僅僅是感受態被質粒汙染了
8樓:匿名使用者
感受態可能被其它帶有這種抗生素抗性的質粒汙染了,制感受態的時候注意挑取單菌落,建議你重製,不然下游反應或是測序可能受影響
9樓:匿名使用者
不一定 建議重新做一下
takara感受態製備試劑盒可以製備農桿菌感受態嗎
10樓:電
20mm應該來20mm吧
配置20mm氯化鈣
首先要源看氯化鈣水氯化鈣氯化鈣水合物根據其量進行計算假設cacl2.nh2o量n則配置 1l 20mm cacl2需要加 n*20/1000 g cacl2.nh2o
類推這種提問感覺沒有意義
這個可以自己找下資料
農桿菌感受態細胞製備失敗和質粒沒有轉進去的可能原因
11樓:匿名使用者
1.你到底是 感受態沒製備好呢?還是轉化了,但平板上沒克隆呢?
2.你轉一個有人轉成功過的試試,排除感受態和你自己操作是不是有問題?
3.你用的是 哪種菌啊?lba4404?gv3101? 3抗有沒有+錯啊?
4.你是電擊?熱擊?
大腸桿菌感受態和農桿菌感受態的選擇
除非你的實驗目的一定要求你要用農桿菌，或者是最後一步要轉基因了，否則，大腸桿菌更好，因為它的商業化各種都很齊全，想要什麼就有什麼。大腸桿菌dh5a感受態細胞與大腸桿菌bl21感受態細胞有什麼區別 首先，這兩種菌的基因型不一樣，這就導致了這兩種菌有不同的用途 dh5a是用於克隆的，構建質粒，建庫，保藏...
農桿菌感受態細胞用什麼方法進行製備
1.挑取bai少許農桿菌lba4404，接種於du5ml lb液體培養基 含50mg l str 中，28 zhi200r mim培養dao過夜。內2.取2ml培養物於 容lb液體培養基 含50mg l str 中繼續培養，直至od800 為0.5左右。3.將培養物置冰浴中30min，4 5000r...
電轉化的感受態能用試劑盒製備嗎,感受態可以再擴增用來製備感受態嗎
應該可以的把 不是有 電轉感受態細菌製備試劑盒嘛 那你這個應該也沒有問題啊 幾種感受態細胞製備 的效果比較 20 1 將培養液轉入離心管中,冰上放置10分鐘,然後於4 C下3000g離心10分鐘。2 棄去上清,用預冷的0.05mol l的cacl2溶液10ml輕輕懸浮細胞,冰上放置15 30分鐘後,...