如何比較細菌蛋白表達量,如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量

2021-03-03 21:27:10 字數 1218 閱讀 9626

1樓:少見多怪

植物油體表達體系的研究進展 劉昱輝、賈士榮** 中國農業科學院生物技術專研究所,北京 摘要:介紹屬了植物種子中油體和油體蛋白(oleosin)的結構特徵及其編碼基因的調控,闡述了用植物油體表達體系這一新型植物生物反應器生產目的蛋白的研究進。

如何檢測一個細胞中的蛋白質表達量

2樓:北京索萊寶科技****

實時熒光定量pcr檢測mrna的表達,然後westernblot檢測蛋白表達量.

首先你確定拿到了這兩種細胞系,通過pcr反應證明一個是野生型一個是突變型,即snp。然後用試劑盒提取rna,設計引物,採用半定量或絕對定量的方法,測定mrna表達水平;然後另取細胞裂解,提取總蛋白,用特異性抗體檢測蛋白表達量。

3樓:匿名使用者

蛋白質分子中關鍵活性部位氨基酸殘基的改變,會影響其生理功能,甚至造成分子病(molecular disease)。例如鐮狀細胞貧血,就是由於血紅蛋白分子中兩個β亞基第6位正常的穀氨酸變異成了纈氨酸,從酸性氨基酸換成了中性支鏈氨基酸,降低了血紅蛋白在紅細胞中的溶解度,使它在紅細胞中隨血流至氧分壓低的外周毛細血管時,容易凝聚並沉澱析出,從而造成紅細胞破裂溶血和運氧功能的低下。另實驗證明,若切除了促腎上腺皮質激素或胰島素a鏈n端的部分氨基酸,它們的生物活性也會降低或喪失,可見關鍵部分氨基酸殘基對蛋白質和多肽功能的重要作用。

所謂「分子病」,首先是蛋白質一級結構的改變,從而引起其功能的異常或喪失所造成的疾病。可見蛋白質關鍵部位甚至僅一個氨基酸殘基的異常,對蛋白質理化性質和生理功能均會有明顯的影響。分子病是基因突變引起的遺傳性疾病,當然首先就是dna分子結構的改變,是其分子編碼相應蛋白質基因結構的改變,這是 2023年美國科學家pauling在研究血紅蛋白時首先提出來的。

目前已知血紅蛋白分子異常有500多種,其中約一半在臨床上可造成分子病。分子病也包括整條多肽鏈在合成時的缺失,如血紅蛋白分子病中的地中海貧血,可缺失血紅蛋白α-亞基或β-亞基等。現在已知人類有幾千種先天遺傳性疾病,其中大多是由於相應蛋白質分子異常或缺失所致。

原來表達目的蛋白的菌株現在怎麼不表達了

4樓:匿名使用者

誘導表達沒有目的蛋白產生原因無非兩種 一是誘導條件不適合目的蛋白的表達,可通過改變培養基,溫度,誘導劑等條件重新摸索出合適的誘導條件。 二是目的蛋白的菌種有問題,可通過塗板挑選單克隆菌落重新培養,或者質粒重新轉化表達菌株等方法優化菌種。

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