1樓:匿名使用者
由於放bai線菌是絲狀細du菌,好氧,在搖
床液zhi體培養過程容易形dao成菌絲球,而呈回不均勻分佈,所以不能用單細答胞細菌的測od值的方法繪生長曲線。
可直接測細胞乾重。即設多個三角瓶,裝量一樣如250毫升三角瓶裝20毫升,每個時間高三個平行。每隔一小時取樣測放線菌細胞乾重。
可用過濾法也可以用離心法,無菌水清洗再離心。重複兩次。之後於攝氏105度乾燥一小時或以上,重量不再改變為止。然後以細胞乾重為y軸,培養時間為x軸繪曲線。
可測蛋白含量。用凱氏定氮法檢測菌絲含氮量,折算成蛋白含量。菌絲收集與處理同上。
供參考。
2樓:匿名使用者
1.心稱其菌絲體乾重
2孢子懸浮液進行計數,比濁法和平板計數法
怎樣測細菌的生長曲線
3樓:du知道君
用od值必須注意,只有透光率在20%~80%之間,濃度與od值的關係才是呈線形的。2、由於用比濁法不能分辨死菌活菌,所以要防止在生長後期死菌與活菌相混合導致od值假增高,我們採用的方法是:第一次測定生長曲線的時候,在測定od值的時候,同時採用臺盼藍染色法作活細胞計數,從而得到一個修正資料。
以後在發酵時就可以只測od值來監測生長狀況了。另外,也有人採用同時接種平板的方法得到修正值的,我覺得太麻煩花時間的說。
生長曲線怎麼測定?
4樓:匿名使用者
一:細菌生長曲線的測定
1 目的
1.1 瞭解細菌生長曲線特點及測定原理
1.2 學習用比濁法測定細菌的生長曲線
2 原理
將少量細菌接種到一定體積的、適合的新鮮培養基中,在適宜的條件下進行培養,定時測定培養液中的菌量,以菌量的對數作縱座標,生長時間作橫座標,繪製的曲線叫生長曲線。它反映了單細胞微生物在一定環境條件下於液體培養時所表現出的群體生長規律。依據其生長速率的不同,一般可把生長曲線分為延緩期、對數期、穩定期和衰亡期。
這四個時期的長短因菌種的遺傳性、接種量和培養條件的不同而有所改變。因此通過測定微生物的生長曲線,可瞭解各菌的生長規律,對於科研和生產都具有重要的指導意義。
測定微生物的數量有多種不同的方法,可根據要求和材料
3.1菌種
大腸桿菌
3.2培養基
肉膏蛋白腖培養基
3.3 儀器和器具
721分光光度計,比色杯,恆溫搖床,無菌吸管,試管,三角瓶。
4 流程
種子液→標記→接種→培養→測定
5 方法
5.1種子液製備
取大腸桿菌斜面菌種1支,以無菌操作挑取1環菌苔,接入肉膏蛋白腖培養液中,靜止培養18h作種子培養液。
5.2標記編號
取盛有50ml無菌肉膏蛋白腖培養液的250ml三角瓶11個,分別編號為0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20h。
5.3接種培養
用2ml無菌吸管分別準確吸取2ml種子液加入已編號的11個三角瓶中,於37°C下振盪培養。然後分別按對應時間將三角瓶取出,立即放冰箱中貯存,待培養結束時一同測定od值。
5.4生長量測定
將未接種的肉膏蛋白腖培養基傾倒入比色杯中,選用600nm波長分光光度計上調節零點,作為空白對照,並對不同時間培養液從0h起依次進行測定,對濃度大的菌懸液用未接種的牛肉膏蛋白腖液體培養基適當稀釋後測定,使其od值在0.10.~0.
65以內,經稀釋後測得的od值要乘以稀釋倍數,才是培養液實際的od值。
6 結果
6.1 將測定的od值填入下表:
時 間(h) 對照 0 1.5 3 4 6 8 10 12 14 16 20
光密度值(od600)
6.2 以上述**中的時間為橫座標,od600 值為縱座標,繪製大腸桿菌的生長曲線。
問答題 細菌生長曲線分為哪幾個時期?各有何特點
5樓:墨滅故事
遲緩期、對數期、穩定期、衰亡期
遲緩期此期曲線平坦穩定,因為細菌繁殖極少。此期中細菌體積增大,代謝活躍,為細菌的**增殖合成、儲備充足的酶、能量及中間代謝產物。
對數期此期生長曲線上活菌數直線上升。細菌以穩定的幾何級數極快增長,可持續幾小時至幾天不等。此期細菌形態、染色、生物活性都很典型,對外界環境因素的作用敏感。
穩定期該期的生長菌群總數處於平坦階段,但細菌群體活力變化較大。細菌繁殖速度漸趨下降,相對細菌死亡數開始逐漸增加,此期細菌增殖數與死亡數漸趨平衡。
衰亡期隨著穩定期發展,細菌繁殖越來越慢,死亡菌數明顯增多。此期細菌變長腫脹或畸形衰變,甚至菌體自溶,難以辨認其形。生理代謝活動趨於停滯。
擴充套件資料:
細菌生長曲線檢測方法
體積測量法:
通過測定一定體積培養液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。取一定量的待測培養液(如10毫升)放在有刻度的離心管中,設定一定的離心時間(如5分鐘)和轉速(如5000 rpm),離心後,倒出上清夜,測出上清夜體積為v,則菌絲濃度為(10-v)/10。
稱乾重法:
可用離心或過濾法測定。一般乾重為溼重的10-20%。在離心法中,將一定體積待測培養液倒入離心管中,設定一定的離心時間和轉速,進行離心,並用清水離心洗滌1-5次,進行乾燥。
乾燥可用烘箱在105 °C或100°C下烘乾,或採用紅外線烘乾,也可在80°C或40°C下真空乾燥,乾燥後稱重。
比濁法:
微生物的生長引起培養物混濁度的增高。通過紫外分光光度計測定一定波長下的吸光值,判斷微生物的生長狀況。對某一培養物內的菌體生長作定時跟蹤時,可採用一種特製的有側臂的三角燒瓶。
將側臂插入光電比色計的比色座孔中,即可隨時測定其生長情況,而不必取菌液。
菌絲長度測量法:
對於絲狀真菌和一些放線菌,可以在培養基上測定一定時間內菌絲生長的長度,或是利用一隻一端開口並帶有刻度的細玻璃管,到入合適的培養基,臥放,在開口的一端接種微生物,一段時間後記錄其菌絲生長長度,藉此衡量絲狀微生物的生長。
6樓:一氧化氫氕氘氚
細菌是微生物,微生物的生長分為四個時期:
1 延滯期:又叫調整期,細菌代謝活躍,大量合成細胞**所需的酶類、atp以及其他細胞成分。
細胞往往不生長繁殖,其數目無明顯增加。為後面做準備,相當於適應新環境。
2 對生長數期:細菌代謝旺盛,個體的形態和生理特性比較穩定調整期和對數期的細菌幾乎不存在
種內鬥爭),開始迅速繁殖,由於細菌以**方式繁殖,細胞數目呈幾何級數增加。
3 穩定期:有害代謝產物積累,新增細胞數目與死亡細胞數目達到動態平衡,次級代謝產物大量積
累,形成芽孢(穩定期的細菌種內鬥爭最激烈),繁殖速率逐漸下降。
4 衰亡期:細菌數目急劇下降,出現畸形細菌(衰亡期的細菌和無機環境的鬥爭最激烈),營養耗
盡,大量死亡。
7樓:匿名使用者
細菌的生長繁殖的4個時期:
遲緩期,對數期,穩定期,衰亡期。
遲緩期(lag phase):又叫調整期。細菌接種至培養基後,對新環境有一個短暫適應過程(不適應者可因轉種而死亡)。
此期曲線平坦穩定,因為細菌繁殖極少。遲緩期長短因素種、接種菌量、菌齡以及營養物質等不同而異,一般為1~4小時。此期中細菌體積增大,代謝活躍,為細菌的**增殖合成、儲備充足的酶、能量及中間代謝產物。
對數期(logarithmic phase):又稱指數期。此期生長曲線上活菌數直線上升。
細菌以穩定的幾何級數極快增長,可持續幾小時至幾天不等(視培養條件及細菌代時而異)。此期細菌形態、染色、生物活性都很典型,對外界環境因素的作用敏感,因此研究細菌性狀以此期細菌最好。抗生素作用,對該時期的細菌效果最佳。
穩定期(stationary phase):該期的生長菌群總數處於平坦階段,但細菌群體活力變化較大。由於培養基中營養物質消耗、毒性產物(有機酸、h2o2等)積累ph下降等不利因素的影響,細菌繁殖速度漸趨下降,相對細菌死亡數開始逐漸增加,此期細菌增殖數與死亡數漸趨平衡。
細菌形態、染色、生物活性可出現改變,併產生相應的代謝產物如外毒素、內毒素、抗生素、以及芽胞等。
衰亡期(decline phase):隨著穩定期發展,細菌繁殖越來越慢,死亡菌數明顯增多。活菌數與培養時間呈反比關係,此期細菌變長腫脹或畸形衰變,甚至菌體自溶,難以辯認其形。
生理代謝活動趨於停滯。故陳舊培養物上難以鑑別細菌。
細菌的生長曲線如何確定,有何意義
8樓:匿名使用者
細菌生長曲線(bacterial growth curve)是專指單細胞微生物的。它是將少量的單細胞微生物接種純種到一定容積的液體培養基後,在適宜的條件下培養,定時取樣測定細胞數量。以細胞增長數目的對數做縱座標,以培養時間做橫座標,繪製的一條曲線,這條曲線稱為細菌的生長曲線。
生長曲線一般包括了細菌的生長繁殖的4個時期:遲緩期,對數期,穩定期,衰亡期,反映了細菌數量、生長狀況和代謝情況等多種重要指標,可以參照生長曲線,根據需要控制微生物的生長,來達到你需要的效果。
9樓:人生如夕陽
細菌的生長曲線有4個時期:調整期,對數期,穩定期,衰亡期.它表示了細菌生長過程中各個過程的情況,每個時期都有自己特定的優勢微生物.
你可以參照生長曲線,根據你的需要控制微生物的生長,來達到你需要的效果.
10樓:呃呃呃呃這個嘛
確定方法:
將少量的單細胞微生物接種純種到一定容積的液體培養基在適宜的條件下培養
定時取樣(至少有5-6個時間點),用od600(optical density)測定細胞數量
以細胞增長數目的對數做縱座標,以培養時間做橫座標,繪製一條曲線.
意義:生長曲線反映了細菌數量、生長狀況和代謝情況等多種重要指標
測定微生物的生長曲線有幾種方法?要配置怎麼的培養基。。。求詳解!!!謝謝
11樓:匿名使用者
首先回答你的第二
抄個問題——襲配製怎樣的培養基。這具體要看你培養什麼菌種而定。很多微生物有自己的特定培養基,或最適培養基。譬如大腸桿菌可以用lb或tb,酵母可以用ypd,細菌可以用營養肉湯等。
至於生長曲線的測定,一般是用如下方法:取菌種接種到對應培養基中(500ml三角瓶裝100ml培養基),合適的溫度和轉速培養。每隔一定時間取樣檢測od值。
每種微生物的生長曲線雖說都是經歷四個階段,趨勢一樣,但是其各個階段所處的時間長短是不一樣的,所以,在取樣時間上應該根據菌種的生長特性來調整。
細菌生長曲線的測定隔多長時間測一次細菌數目
12樓:匿名使用者
細菌生長曲線,是bai將少量的單細胞du微生物zhi接種純種到一定容積的液體培養基dao後,在版適宜的條件下培養,權定時取樣測定細胞數量,以細胞增長數目的對數做縱座標,以培養時間做橫座標,繪製一條如圖所示的曲線。
生長曲線顯示了細菌的生長繁殖的4個時期:遲緩期、對數期、穩定期、衰亡期。
遲緩期:又叫調整期。細菌接種至培養基後,對新環境有一個短暫適應過程(不適應者可因轉種而死亡)。
此期曲線平坦穩定,因為細菌繁殖極少。遲緩期長短因素種、接種菌量、菌齡以及營養物質等不同而異,一般為1~4小時。此期中細菌體積增大,代謝活躍,為細菌的**增殖合成、儲備充足的酶、能量及中間代謝產物。
放線菌和細菌的區別，真菌和細菌放線菌有什麼區別？
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酵母菌 蘑菇等真菌和細菌 放線菌的最主要的區別是
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