融合基因的兩個啟動子相連,蛋白會表達嗎
1樓:匿名使用者
融合基因的兩個啟動子相連,蛋白會表達。
融合蛋白是指在基因工程迅速發展的基礎上,通過dna重組技術將兩個或多個基因的編碼區首尾連線,由同一調控序列控制構成的基因表達後所得的蛋白質產物。融合蛋白技術是為獲得大量標準融合蛋白而進行的有目的性的基因融合和蛋白表達方法。利用融合蛋白技術,可構建和表達具有多種功能的新型目的蛋白。
融合蛋白有兩種不同的含義,一種是通過dna重組技術得到的兩個基因重組後的表達產物。另一種含義就是介導兩個細胞質膜融合的一組蛋白,如在仙台病毒脂雙層外側小葉中含有的兩種糖蛋白之一,介導病毒被膜與宿主細胞質膜的融合作用。另一種糖蛋白是血細胞凝集素神經醯胺酶。
兩個不同的蛋白質連成乙個大分子。可以通過化學方法連線,也可通過基因的融合來實現。在基因操作中,對一些分子數小的多肽基因常採用融合的方法與某一基因(如lac)相連,二者之間接上某一酶(如凝血酶)的切口,以增加在體內表達後產物的穩定性,也有的故意使兩個分子串連融合以提高療效,如il-3與gm-csf。
也有與分泌性蛋白的訊號肽基因組成融合基因,以使表達產物分泌到膜外或胞外。 在基因工程迅速發展的基礎上,有目的地把兩段或多段編碼功能蛋白的基因連線在一起,進而表達所需蛋白,這種通過在人工條件下將兩個或多個基因的編碼區首尾連線,由同一調控序列控制構成的基因表達後所得的蛋白質產物稱為融合蛋白。
flag標籤作用
2樓:
可以通過基因工程技術手段將所要研究的目的基因和flag-tag基因序列連線起來,可以連線在目的蛋白的c端或n端, 然後將整合後的基因轉入細胞中或胚胎幹細胞抑或受精卵中。
後續檢測主要通過flag-tag這段肽鏈形成的免疫決定簇與其單轉殖抗體的特異性結合來實現。 檢測手段有免疫螢光(immunofluorescence), 免疫印記(western blotting)等。
隨著生物技術的發展,科研人員可以通過dna重組技術,構建包含目的基因以及表位標記的融合蛋白,進而通過特異性標籤抗體對其鑑定與純化,以達到研究的需求。
3樓:春素小皙化妝品
可以簡化蛋白質的純化過程、控制蛋白質固定的空間取向及方便檢測、使體內生物事件視覺化、提高重組蛋白質的產量、增強重組蛋白質的可溶性和穩定性等。flag標籤系統利用乙個短的親水性八氨基酸肽(dykddddk)融合到目標蛋白。
flag-標籤指一段由8個氨基酸殘基組成的。flag標籤可位於蛋白質的c端或n端,該系統已廣泛應用於各種細胞型別,包括細菌、酵母和哺乳動物細胞等,相應的flag標籤抗體也被廣泛應用。
由於flag標籤系統的純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋白。flag標籤可以通過加入腸激酶處理去除,腸激酶專一識別該肽序列c末端的5個氨基酸殘基。
4樓:s小作者
flag標籤蛋白為編碼8個氨基酸的親水性多肽(dykddddk),同時載體中構建的kozak序列使得帶有flag的融合蛋白在真核表達系統中表達效率更高。 flag作為標籤蛋白,其融合表達目的蛋白後具有以下優點:
flag作為融合表達標籤,其通常不會與目的蛋白相互作用並且通常不會影響目的蛋白的功能、性質,這樣就有利用研究人員對融合蛋白進行下游研究。
融合flag的目的蛋白,可以直接通過flag進行親和層析,此層析為非變性純化,可以純化有活性的融合蛋白,並且純化效率高。
flag作為標籤蛋白,其可以被抗flag的抗體識別,這樣就方便通過western blot、elisa等方法對含有flag的融合蛋白進行檢測、鑑定。
融合在n端的flag,其可以被腸激酶切除(dddk),從而得到特異的目的蛋白。因此現flag標籤已廣泛的應用於蛋白表達、純化、鑑定、功能研究及其蛋白相互作用等相關領域。
希望對你有幫助哦~^^
乙個植物中的同乙個酶的兩種亞型,是說明有兩個基因編碼這兩種酶嗎?
5樓:凡星一點點點點
乙個基因編碼乙個酶。如果你表達的意思是同一種酶的不同亞型的話,肯定是兩個基因。
有沒有可能在兩個不同的物種中找到相同的基因序列,但是找不到此基因產生的蛋白質?
6樓:網友
有可能的。兩個不同物種都擁有同一種基因而且保守度很高甚至完全相同,這種情況其實挺多的。至於有基因但沒有相應的蛋白也正常,基因不表達就是了。並不是所有的基因都一定表達為蛋白的。
7樓:愛上微生物
找到相同的基因很正常,例如水平基因轉移。
基因對應的蛋白不知道也很正常,我們熟知的蛋白本來就很少,很多基因對應的蛋白和功能都在探索中。
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