如何將目的基因整合到細菌染色體中去

2025-07-26 16:15:20 字數 2794 閱讀 6519

1樓:網友

一般方法和步驟:

確定目的基因需要整合到基因組上的位置;

設計整合片段:目的基因兩端連線與基因組上目的基因的位置兩端的序列同源,這兩個片段分別稱之為上、下同源臂,長度一般在70bp至200之間,上下同源臂之間一般除了目的基因還要帶上篩選標記基因,同源臂之間(包括同源臂)這一段序列稱為插入片段;

插入片段可以直接電轉化或者顯微注射轉化篩選,一般需要多次實驗才能成功,而且大部分細菌暫時無法電轉化和顯微注射;

不能直接轉化的,插入片段需要構建到載體質粒上(在大腸桿菌上完成),載體要帶有自殺原件或者負篩選標記,再轉化到目的菌株篩選。

具體技術過程,可以查詢微生物同源重組、基因組整合這些文獻參考。

目的基因如何整合到動物細胞的染色體dna上

2樓:你的殘愛

迄今為止,顯微注射技術是轉基因動物中採用最多,也是最為有效的一種將目的基因匯入動物的方法。

3樓:匿名使用者

對於動物細胞,一般整合到染色體的多,獨立質粒形式的少,但都是有的。

基因工程中,目的基因匯入真核生物中,目的基因是否都是整合到染色體上

4樓:網友

不一定,要看你的載體是什麼型別的。目的基因匯入受體生物,要選擇攜帶基因的載體的,比如質粒載體或者病毒載體。但是據我經驗,我見過大多數的真核轉化載體都是整合到染色體上的。

整合載體的好處是能夠穩定地在宿主體記憶體在並穩定遺傳。而原核的轉基因大多以質粒的形式存在於細胞中。原核最常見的就是大腸桿菌轉化。

質粒載體上攜帶某種或者某幾種抗生素抗性基因。我們向培養基中新增抗生素,利用選擇壓力來保持菌群中的細菌都有此質粒存在(發生質粒丟失或者沒有質粒的都死掉了,不會使菌群變雜)。

5樓:公尺蘭卡寶

原核生物應該不一樣了吧,因為目的基因已經改造了它。目的基因應該也已經整合到了染色體上,不然怎麼複製表達呢?

目的基因匯入受體細胞都會整合到受體細胞的染色體中嗎

6樓:網友

當然不是,多數情況下,目的基因轉到了葉綠體dna或線粒體dna上,其次到核染色體上或細菌質粒上。

7樓:亓楣風

這個問題啊,你的問題比較混亂。

首先,這個問題呢是生物工程裡面講到的基因工程的,高中生物書上也介紹過,講目的基因轉入受體細胞的染色體上,理論上呢,應該是轉入的目標細胞的染色體上的,不然就沒有意義咯。

在檢測的時候的方法呢有很多種,實驗室呢主要是標記法就是用同位素標記,最後檢受體細胞內是否能檢測到這種同位素(子代細胞),還有就是檢測這個匯入基因是否在受體細胞內發揮作用,就是檢測她的表達產物。

順便說一句呢,是不是所有的基因都可以插入,這個呢我看應該是不可以的吧,因為很多因素限制了基因的作用,具體的呢應該是分子生物學上要講的 我們呢還正在上這個課呢。

農桿菌ti質粒是怎樣把t-dna-目的基因整合到受體細胞的染色體dna上的?書上說組成細菌和植物

8樓:蔥在**

通過同一種dna限制酶切割,t-dna-目的基因和染色體dna,使兩者有互補的鹼基序列,再用dna連線酶鏈結,這樣就把t-dna-目的基因整合到受體細胞的染色體dna上了。

9樓:匿名使用者

具體的細節的查資料,但是對於膿桿菌而言,他本身的質粒具有這種功能,可以將自身轉入為植物基因組的一部分。

f因子怎樣整合到細菌染色體的?

10樓:河馬小店

這個過程 真的不是 一兩句話就能說清楚的,這些時課件,上面很形象,你下來看看。

作為基因工程載體,其應具備哪些條件

11樓:靠名真tm難起

1、在宿主細胞中能儲存下來並能大量複製,且對受體細胞無害,不影響受體細胞正常的生命活動。

2、有一定的標記基因,便於進行篩選。如大腸桿菌的pbr322質粒攜帶氨苄青黴素抗性基因和四環素抗性基因,就可以作為篩選的標記基因。一般來說,天然運載體往往不能滿足上述要求,因此需要根據不同的目的和需要,對運載體進行人工改建。

現在所使用的質粒載體幾乎都是經過改建的。

3、含有複製起始位點,能夠獨立複製;通過複製進行基因擴增,否則可能會使重組dna丟失。

4、有多個限制酶切點,而且每種酶的切點最好只有乙個,如大腸桿菌pbr322就有多種限制酶的單一識別位點,可適於多種限制酶切割的dna插入。

5、載體dna分子大小應合適,以便操作。

12樓:晴晴

條件:①必須有乙個或多個限制酶的切割位點,以便目的基因可以插入到載體上。

載體必須具備自我複製的能力,或整合到受體染色體dna上隨染色體dna的複製而同步複製。

必須帶有標記基因,以便進行重組後的篩選。

必須是安全的,不會對受體細胞有害,或不能進入到除受體細胞外的其他生物細胞中去。

大小應合適,太大則不易操作。

基因操作中要獲取目的基因必須有乙個或多個限制酶的切割位點,以便目的基因可以插入到載體上;載體必須具備自我複製的能力,或整合到受體染色體dna上隨染色體dna的複製而同步複製;必須帶有標記基因,以便進行重組後的篩選;必須是安全的;大小應合適,太大則不易操作。

13樓:再別康橋要留心

作為基因工程載體,其應具備以下條件:

第。一、能夠在宿主細胞中複製並穩定地儲存;

第二,具有多個限制酶切點,以便與外源基因連線;

第三,具有標記基因,以便於進行篩選。

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