1樓：飛機
cre-loxp重組酶系統在新型基因打靶中獲得廣泛應用，是條件性基因打靶、誘導性基因打靶、時空特異性基因打靶策略的技術核心。
cre-loxp重組酶系統的cre-loxp系統的特性
2樓：殳盼巧
cre重組酶介導兩個loxp位點間的重組是乙個動態、可逆的過程，可以分成三種情況：
1、如果兩個loxp位點位於一條dna鏈上，且方向相同，cre重組酶能有效切除兩個loxp位點間的序列；
2、如果兩個loxp位點位於一條dna鏈上，但方向相反，cre重組酶能導致兩個loxp位點間的序列倒位；
3、如果兩個loxp位點分別位於兩條不同的dna鏈或染色體上，cre酶能介導兩條dna鏈的交換或染色體易位。
另外，cre不僅可以識別loxp的2個13bp的反向重複序列和8bp的間隔區域，而且當乙個13bp的反向重複序列或者8bp的間隔區發生改變時仍能識別併發生重組。利用這一特點，人們在構建載體時可以根據需要改造loxp位點序列，以用於特定的基因突變或修復，增加了該系統的應用範圍。
cre重組酶的介紹
3樓：溫柔
cre重組酶是細菌噬菌體p1的i型拓撲異構酶，催化loxp位點間的dna進行位點特異性重組。本酶無需能量輔助因子，cre-介導的重組很快在底物與反應產物之間達到平衡1。
小鼠體內cre重組酶用工具鼠rosa26檢測的原理？
4樓：匿名使用者
rosa純合與帶有cre重組酶（一般是在特殊啟動子下）的小鼠雜交，產生的f1代可以被表達的cre切掉阻礙lacz翻譯的終止子，從而起始lacz表達。因此某些特殊的組織或細胞就可以被lacz染色追蹤。
請詳細講解一下cre/loxp重組系統的機理和應用範圍！
5樓：海角絕情
cre/loxp系統構建tigr、optn基因時空特異性打靶載體； 方法 在通用型時空特異性打靶載體pflox的基礎之上，利用分子轉殖技術，將tigr、optn基因組序列c端功能域置於兩個方向相同的loxp序列之間，將其5』端和3』端序列作為5』同源長臂和3』同源短臂，將neo、tk正負篩選基因置於內含子中，從而避免篩選基因干擾tigr、optn基因轉錄後拼接；結果 經限制性內切酶、pcr、測序鑑定，確定構建了5』同源長臂為，3』同源短臂為2kb，第三外顯子位於兩個loxp序列之間的tigr基因時空特異性打靶載體， 以及5』同源長臂為，3』同源短臂為，第。
四、五外顯子位於兩個loxp序列之間的optn基因時空特異性打靶載體。結論 利用cre/loxp系統成功構建了tigr、optn基因時空特異性打靶載體，為進一步構建tigr、optn基因時空特異性基因敲除小鼠奠定基礎。本課題獲國家自然科學**（30300380）、廣東省自然科學**重點專案（36649）、廣東省教委**資助。
cre/loxp系統的三種模式是什麼？
6樓：網友
<>同向位點之間序列的缺失(圖1a) ;
插入序列(圖1b)
兩個反向位點之間序列顛倒(圖1c)
以cre-loxp系統為例簡述什麼是條件性基因敲除
7樓：
基因敲除：又稱基因打靶歷閉，該技術通過外源梁爛李dna與染色體dna之間的同源重組，進行精確的定點修飾和基因改造，具有專一性強、染色體dna可與目的片段共同穩定遺傳等特點。
條件型基因敲除：例：cre/loxp和flp/frt 系統所開展的組織特異性敲橡遲除。優點：可以防止完全基因敲除導致胚胎死亡。
請問cre/loxp轉基因小鼠為什麼要通過雜交獲得？能不能直接將cre和loxp匯入同乙個es細胞裡？
8樓：網友
現在的基因插入小鼠基本還是用的同源重組的方式，對基因組對定點插入修飾，但是同源重組有乙個問題就是，它發生的自然概率非常低，因此你別說同時轉兩個質粒進去，就是拿到乙個成功打靶的細胞也非常不容易，因此需要進行大量的篩選工作，同時引入兩個位點修飾，一是卵母細胞很難轉染，加上你轉進去了期待其發生同源重組的概率又比較低，因此基本不具有現實可行性。而你如果分別有兩種老鼠，其實配很快的。
另外將這兩個東西分開更大好處在於利於自由組合研究，比如，cre有x種不同臟器的，而loxp你可以做y種不同基因的，這樣你就可以自由組合做x乘以y種老鼠，也就是可以任意在不同組織敲不同基因，方便又自由，可以極大拓展你可以研究的領域。
再者，另外一種比較奇葩的情況就是，假設你的敲除老鼠致死，尤其是胚胎致死，那麼結果會是，你翻來覆去往裡倒基因，結果始終拿不到敲除老鼠，然後你就懷疑了，到底是你運氣背或者操作不好，始終不能實現打靶，還是本來這個基因敲除就會致死，把cre和loxp分開就很好的解決了這個問題，因為理論上這兩個東西單獨乙個絕對不可能致死，若是胚胎致死那麼你可以解剖孕鼠做基因型鑑定來確定。
設計loxp-stop-loxp中stop位點有什麼要求
9樓：網友
推薦的結構是loxp - sv40 poly(a) signal-sv40 poly(a) signal-sv40 poly(a) signal - loxp
帶有3×的sv40 poly(a) signal可以更好的終止基因的轉錄。
具體序列可以訊息問我。
10樓：原生態紅谷
這個不知道你所指的具體情況是什麼。 個人認為應該是載體系統。 loxp和frt都是位點特異性重組酶，主要的用途就是載體轉錄**染）的過程中將目的基因重組到基因組的特定位置。
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