1樓:網友
280是蛋白質的吸收峰,260是dna的吸收峰。
260/280偏高是dna汙染。
大神們,求助rna提取260/230低的問題
2樓:北京索萊寶科技****
260/230比值偏小,是有鹽汙染,解決的辦法是:
在乙醇洗脫步驟時:
乙醇,4℃,7500g/min,離心5min;
2、倒掉乙醇,再加入75%乙醇,條件同上,做第二次洗脫(注意,這次ep管在離心機。
裡的擺放方向與第一次相反,以便能更全面的洗脫);
3、再次掉轉ep管在離心機中的方向(不再加入乙醇),7500g/min,4℃,離心3min
後,用200μl的槍小心吸去乙醇(注意不要吸到管底的rna),然後開蓋晾乾乙醇即。
可。這樣做後,比只用乙醇洗一次的效果要好很多,我們所提rna用nanodrop測得260/230
值均在左右。
注意倒掉乙醇後再離心一次,把沾在管壁的乙醇離下來。
3樓:愈生愛嘮叨的人
1、提取rna測濃度時 a260/a280 大於3的原因可能是降解。
2、一般對於dna,純淨的時候比值是,而對於rna則是接近。如果超過這個值,那麼最有可能的就是核酸。
降解了,因為寡聚的核酸和核苷酸。
在260的吸收峰比長鏈核苷酸要大,所以會使比值上公升。
提rna a260/a280低是否與rna含量低有關
4樓:清晨在雲端
rna一般指核糖核酸。
核糖核酸(縮寫為rna,即ribonucleic acid),存在於生物細胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳資訊載體。rna由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。乙個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和鹼基構成。
rna的鹼基主要有4種,即a腺嘌呤、g鳥嘌呤、c胞嘧啶、u尿嘧啶,其中,u(尿嘧啶)取代了dna中的t。
提取的c級rna,od 260/280的比值均大於2,做轉錄組測序時有影響嗎
5樓:匿名使用者
提取的好壞關鍵看膠圖28s18s的比例。
rna 260/230 y影響定量嗎
6樓:網友
定量是根據260的吸光度,而230吸光度是反應的有機試劑的汙染,280吸光度是反應的蛋白質汙染。
這個比例雖然不影響定量,但是比例低於,會影響到後面的各種反應,就算實際測的濃度是對的,但是卻達不到該濃度的效果,比如cdna產量少等等。
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