求SDS PAGE 配方 分離膠 7 5 濃縮膠 4

2025-07-19 03:25:21 字數 1812 閱讀 8482

1樓:網友

5ml 分離膠:

h2o30%丙烯醯胺溶液。

tris(10%sds 50ul

10%aps 50ul

temed 4ul

5ml 4%濃縮膠:

h2o 3ml

30%丙烯醯胺溶液 670ul

tris(10%sds 50ul

10%aps 50ul

temed 4ul

sds-page電泳中,分離膠和濃縮膠的配方是不是隻有tris-cl的ph不同

2樓:匿名使用者

在sds-page不連續電泳中,制膠緩衝液使用的是tris-hcl緩衝系統,濃縮膠是,分離膠;而電泳緩衝液使用的tris-甘氨酸緩衝系統。在濃縮膠中,其ph環境呈弱酸性,因此甘氨酸解離很少,其在電場的作用下,泳動效率低;而cl離子卻很高,兩者之間形成導電性較低的區帶,蛋白分子就介於二者之間泳動。由於導電性與電場強度成反比,這一區帶便形成了較高的電壓剃度,壓著蛋白質分子聚集到一起,濃縮為一狹窄的區帶。

當樣品進入分離膠後,由於膠中ph的增加,呈鹼性,甘氨酸大量解離,泳動速率增加,直接緊隨氯離子之後,同時由於分離膠孔徑的縮小,在電場的作用下,蛋白分子根據其固有的帶電性和分子大小進行分離。

sds-page怎麼配製

3樓:網友

如果說你要具體的配方的話,我覺得你給的條件少了。

13%指的是丙烯醯胺的終濃度。儘管你給了29:1這個比例,但是你沒有說你所配的丙烯醯胺的濃度。

丙烯醯胺儲液一般有30%和40%的。對於相同的濃度的膠來說,29:1和:

1這個比例不會影響到你所需要的儲液的量,只有儲液的濃度才關係到膠的%。譬如說10ml的膠,我加入1ml的40%的凝膠儲液,那麼他的濃度就為40%*1/10=4%。 tris-hcl給的是終濃度,自己摺合下應該加多少buffer就行了。

另外sds你多打了個l。

覺得你把膠配好了應該多看點書,不要光要個答案而不知所以然。

4樓:123來不及

我記得當年我們是先分別配成甲叉和丙烯醯胺的母液,在按不同比例配成分離膠和濃縮膠的,但具體濃度不記得了。

sds-page電泳中,分離膠和濃縮膠的配方是不是隻有tris-cl的ph不同?

5樓:網友

分離膠buffer: tris,。

濃縮膠buffer: tris,。

ph值不同,濃度也不同。

我的實驗中,膠濃度:分離膠(12%)和濃縮膠(5%)

怎麼根據蛋白的分子量決定sds-page電泳中分離膠和濃縮膠的濃度

6樓:網友

你找任何一本有關於蛋白電泳實驗指導的書。

不同濃度的膠對應不同範圍分子量的蛋白,都有的。

不是算,是根據實驗效果總結的經驗。

您好,關於【蛋白質sds-page電泳分離膠和濃縮膠的濃度如何確定?上樣緩衝液的倍數如何確定?的問題

7樓:網友

積層膠12%,分離膠6%,上樣緩衝液4*

8樓:網友

根據分子量大小來確定。

tricine-sds-page遇見的問題

9樓:網友

應該是膠凝固不均勻。一般膠厚的話容易出現兩頭翹。

10樓:網友

不是膠的問題 應該是 你蛋白的溶液有問題。

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