PCR擴增和菌體內擴增DNA有何區別?

2025-05-04 20:00:06 字數 2113 閱讀 2261

1樓:皮吉孛載

pcr實際上是在體外模擬dna體內複製的過程。和體內dna複製一樣,pcr在擴增dna的時候也會經歷dna雙鏈的解開(變性),寡聚核酸與單鏈dna的結合(退火),以及dna聚合酶開始合成dna(延伸)的三個過程。但pcr和體內dna複製不同,在體內dna的複製整個過程是由一系列酶所控制的,所以像dna解鏈等在體溫下就可以完成。

而pcr則需要乙個高溫來完成dna的解鏈,所以pcr反應的dna

taq聚合酶是耐高溫的酶。此外,無論體內或拍好隱者pcr反應,dna的合成都需要一小段寡聚核酸作為引物。

提供3『羥基末端,以讓dna聚合酶識別並開始合成dna。在體內這個3』羥基末端是由寡聚的rna提供,而在pcr中則由寡聚的dna提供,因為dna分子比rna分子穩定易於儲藏和使用。在體內雙鏈dna聚合方向是5『襲廳-3』的,其中一條鏈是5『-3』,而另外一條鏈雖然也是5『-3』,但它是由岡崎片段。

連線起來的,而總體的合成方向是3『-5』。在pcr反應中,每一條鏈的合成方向都是5『-3』,沒有類似岡崎片段的東西。在體內,dna聚合是從複製起始位點開始的,由聚合酶識別複製起始位點。

而在pcr反應中,dna的聚合是從引物結合處開始的,主要是由引物的特異性。

來控制複製的起始位置襪族。基本上就是這樣了。

分析體內dna複製和體外pcr擴增dna有何異同點

2樓:信必鑫服務平臺

相同點: 都是半保留複製,都會經歷dna雙鏈的解開(變性),寡聚核酸與單鏈dna的結合(退火),以及dna聚合酶開始合成dna(延伸)的三個過程。

不同點: 1、連續性不同。

體內dna複製半不連續複製,體外pcr連續複製,不會產生岡崎片斷。

2、酶不同。

pcr技術形成dna時用耐熱dna聚合酶,而dna複製用的是生物體自身的dna聚合酶,普通的dna聚合酶是不耐熱的。

3、溫度不同:

體內dna複製溫度是37度,體外pcr有變性、退火、延伸三種溫度。

4、引物不同。

dna複製需要的引物是rna,不是dna。之後按照引物就能夠複製出dna來,重複放大50次後就可以製成10億個基因。

體外pcr通常是dna引物。在pcr放大過程中的關鍵是利用耐熱dna聚合酶使少量的dna在短期內即能擴增數百萬倍,便於分析、檢測。

分析體內dna複製和體外pcr擴增dna有何異同點

3樓:網友

相同點:都是半保留複製。

不同點:1、酶不同,體內主要是dna聚合酶,體外是taq酶;2、溫度不同,體內是37度,體外有變性、退火、延伸三種溫度;3、解鏈方式不同,體內採用解旋酶同時消耗atp,體外採用熱變性;4、體內的聚合酶有校對功能,體外的taq酶沒有校對功能;4、體內所用引物是rna,體外一般是dna引物。

4樓:網友

pcr實際上是在體外模擬dna體內複製的過程。和體內dna複製一樣,pcr在擴增dna的時候也會經歷dna雙鏈的解開(變性),寡聚核酸與單鏈dna的結合(退火),以及dna聚合酶開始合成dna(延伸)的三個過程。但pcr和體內dna複製不同,在體內dna的複製整個過程是由一系列酶所控制的,所以像dna解鏈等在體溫下就可以完成。

而pcr則需要乙個高溫來完成dna的解鏈,所以pcr反應的dna taq聚合酶是耐高溫的酶。此外,無論體內或者pcr反應,dna的合成都需要一小段寡聚核酸作為引物提供3『羥基末端,以讓dna聚合酶識別並開始合成dna.在體內這個3』羥基末端是由寡聚的rna提供,而在pcr中則由寡聚的dna提供,因為dna分子比rna分子穩定易於儲藏和使用。

在體內雙鏈dna聚合方向是5『-3』的,其中一條鏈是5『-3』,而另外一條鏈雖然也是5『-3』,但它是由岡崎片段連線起來的,而總體的合成方向是3『-5』.在pcr反應中,每一條鏈的合成方向都是5『-3』,沒有類似岡崎片段的東西。在體內,dna聚合是從複製起始位點開始的,由聚合酶識別複製起始位點。

而在pcr反應中,dna的聚合是從引物結合處開始的,主要是由引物的特異性來控制複製的起始位置。基本上就是這樣了。我們是驗室用biog kit做pcr實驗檢測目標rna,做下來s型曲線的起跳值在28左右。

5樓:舞陽人樂園

他們有完全不同的差別,因為第乙個誒,它是螺旋式的耳pcr,它是漸進式的。

pcr變性退火延伸的定義pcr技術擴增目的基因為什麼要退火

變性 加熱使模板dna在高溫下 94 左右 雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈。退火 使溶液溫度降至50 60 模板dna與引物按鹼基配對原則互補結合。延伸 溶液反應溫度升至72 耐熱dna聚合酶以單鏈dna為模板,在引物的引導下,利用反應混合物中的4種脫氧核苷三磷酸 dntp 按5 一3 方向複製出互...

pcr可以擴增質粒嗎為什麼有了pcr還要用大腸桿菌

pcr一般用來擴增雙鏈的dna,所以如果是雙鏈的質粒就能用pcr擴增。不過pcr擴增有可能回會產生突變。如果用高答保真的酶擴增,突變概率比較小,但是很貴。此外,pcr會在雙鏈dna末端加鹼基,作為質粒,pcr玩你還要去送測序。還不如用大腸桿菌擴增。dh5 感受態細胞不表達自身的質粒嗎?擴增質粒後提取...

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