雙縮脲反應,雙縮脲試劑的反應原理是什麼?

2022-03-29 01:55:35 字數 5241 閱讀 9552

1樓:小小芝麻大大夢

在鹼性溶液(naoh)中,雙縮脲(h₂noc-nh-conh₂)能與銅離子(cu₂+)作用,形成紫紅色絡合物(該物質的分子結構式見圖),該反應即雙縮脲反應。

銅溶液作用,就會形成紫色或藍紫色絡合物。

注:除-co-nh-有此反應外,(-conh₂-)、(-ch₂-)、(-nh-)、(-cs-cs-nh₂)等基團亦有此反應。

2樓:海金剛俊傑

雙縮脲法的原理雙縮脲(nh2-co-nh-co-nh2)在鹼性溶液中可與銅離子產生紫紅色的絡合物,這一反應稱為雙縮脲反應。因為蛋白質中有多個肽鍵,也能與銅離子發生雙縮脲反應,且顏色深淺與蛋白質的含量的關係在一定範圍內符合比爾定律,而與蛋白質的氨基酸組成及分子量無關,所以可用雙縮脲法測定蛋白質的含量。

雙縮脲反應主要涉及肽鍵,因此受蛋白質特異性影響較小。且使用試劑價廉易得,操作簡便,可測定的範圍為1~10mg蛋白質,適於精度要求不太高的蛋白質含量的測定,能測出的蛋白質含量須在約0?5mg以上。

雙縮脲法的缺點是靈敏度差、所需樣品量大。干擾此測定的物質包括在性質上是氨基酸或肽的緩衝液,如tris緩衝液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現紅色沉澱。

雙縮脲試劑的反應原理是什麼?

3樓:徐姑娘

答:雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,由於蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在鹼性溶液中發生雙縮脲反應。

雙縮脲試劑是一個用於鑑定蛋白質的分析化學試劑。它是一個鹼性的含銅試液,呈藍色,由0.1g/ml 氫氧化鈉或氫氧化鉀、0.

01g/ml硫酸銅和酒石酸鉀鈉配製。會遇到蛋白質顯紫色。

當底物中含有肽鍵時(多肽),試液中的銅與多肽配位,配合物呈紫色。可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑑定反應的靈敏度為5-160mg/ml。

雙縮脲試劑中真正起作用的是 硫酸銅,而 氫氧化鉀僅僅是為了提供鹼性環境,因此它可被其他鹼,如氫氧化鈉所代替。向試劑中加入碘化鉀,會延長試劑的使用壽命。 酒石酸鉀鈉的作用是保護反應生成的絡離子不被析出變為沉澱,從而使試劑失效。

[1]需要注意的是,能與雙縮脲試劑發生紫色反應的化合物分子中至少含有兩個肽鍵。因此,二肽無法用它來檢驗。

一、優點:雙縮脲法測定蛋白質測定範圍能夠是1~10mg蛋白質,操作簡單、快捷。既適合手工操作,又適合自動化分析,重複性好、線性關係好, 雙縮脲試劑可以長期儲存( 若貯存瓶中有黑色沉澱出現,則需要重新配製)。

二、缺點:靈敏度差,測定範圍窄,樣品需要量大,不同的蛋白質產生顏色的深淺相近,因此它常用於需要快速,但並不需要十分精確的蛋白質測定。 干擾測定的物質包括有:

在性質上是氨基酸或肽的緩衝液,如tris緩衝液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現紅色沉澱。

雙縮脲反應的方程式!!

4樓:假面

方程式如圖:

雙縮脲反應實質是在鹼性環境下的cu離子與雙縮脲發生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發生顏色反應,可以用雙縮脲試劑鑑定蛋白質的存在。

5樓:齊齊茫茫

紫色絡合物分子結構式在鹼性溶液(naoh)中,雙縮脲(h2noc-nh-conh2)能與銅離子(cu2+)作用,形成紫色絡合物(該物質的分子結構式見圖),該反應即雙縮脲反應。

雙縮脲反應是什麼?

6樓:

改良的雙縮脲法快速測定蛋白質含量

(一) 方法原理

蛋白質有兩個以上的肽鍵, 因此有雙縮脲反應。在鹼性溶液中蛋白質與cu++ 形成紫紅色絡合物, 其顏色深淺與蛋白質的濃度成正比, 而與蛋白質的分子量及基酸成分無關。顯色反應受溫度影響頗大, 在常溫(20~25℃)下需1小時, 40℃需15分鐘, 60℃需5分鐘。

(二) 儀器、裝置

1. 儀器 光電比色計;離心機(4000轉/分);分析天平(感量0.0001克或0.001克);恆溫振盪器或恆溫水浴鍋;離心管、刻度吸管。

2. 試劑 4%硫酸銅(cuso4 ·5h2 o)溶液;2.5%酒石酸鉀鈉溶液;雙縮脲試劑配製:

在500毫升容量瓶中, 依次加入4%cuso4 ·5h2 o 30毫升和2.5%酒石酸鉀鈉100毫升, 再慢慢加入5mol/l koh 30毫升, 最後用蒸餾水稀釋至刻度。使用時,再將上述溶液與透明度良好的異丙醇混合。

(三) 測定步驟

1. 酪蛋白標準曲線製備: 稱取國產酪蛋白質2克(磨細至80目)於0.

15mol/l koh溶液中, 加熱溶解並定容至100毫升, 分別取此溶液0.2~0.9毫升8份, 加入10毫升雙縮脲試劑, 在60℃的恆溫水浴振盪器中振盪5分鐘顯色完全, 隨後以4000轉/分離心10分鐘,取離心液在波長550nm下, 以1cm比色杯進行比色測定, 空白為不加酪蛋白的試劑。

同時取此溶液5毫升(雙樣)進行凱氏定氮, 乘以換算係數6.41即為酪蛋白含量。根據測得的光密度值與相應酪蛋白含量進行迴歸, 算出迴歸方程式y=a+bx(x為酪蛋白光密度,y為相應酪蛋白含量克)。

2. 樣品處理與測定: 樣品粉碎磨細通過40目篩孔, 以風乾重樣品或烘乾重樣品測定蛋白質含量。

在分析天平上準確稱取待測樣品0.1000克, 放入乾燥的25毫升凱氏消化瓶或大試管中, 內放幾粒玻璃珠, 加入10毫升雙縮脲試劑, 在60℃的恆溫水浴振盪器上振盪5分鐘, 隨後以4000轉/分離心10分鐘, 取離心液在波長550nm下,以1cm比色杯進行比色測定, 空白為不加樣品的試劑溶液。

(四) 結果計算

將樣品測得的光密度值代入酪蛋白迴歸方程y=a+bx(其中x表示樣品光密度值,y代表樣品蛋白質含量克)。再乘以釋倍數1000,即為100克樣品中蛋白質含量(克)。

附註:(1) 對含脂肪高的樣品溶液與雙縮脲試劑混合後, 若有霧狀沉澱,需讓其靜置二小時以上, 再離心, 取其清液比色。

(2) 異丙醇可降低澱粉的溶解性,有利於蛋白質提取及顯色。

7樓:狸貓

蛋白質和雙縮脲試劑,呈紫色反應,用來檢驗蛋白質。

8樓:浴血黯蝶

紫色絡合物分子結構式

在鹼性溶液(naoh)中,雙縮脲(h2noc-nh-conh2)能與銅離子(cu2+)作用,形成紫色絡合物(該物質的分子結構式見圖),該反應即雙縮脲反應。   雙縮脲反應是肽和蛋白質所特有的,而為氨基酸所沒有的一種顏色反應。一般分子中含有兩個氨基甲酪基(即肽鍵:

-co-nh-)的化合物與鹼性   銅溶液作用,就會形成紫色或藍紫色絡合物。   注:除-co-nh-有此反應外,(-conh2-)、(-ch2-)、(-nh2-)、(-cs-cs-nh2)等基團亦有此反應。

9樓:匿名使用者

在鹼性溶液(naoh)中,雙縮脲(h2noc-nh-conh2)能與銅離子(cu2+)作用,形成紫色絡合物(該物質的分子結構式見圖),該反應即雙縮脲反應。   雙縮脲反應是肽和蛋白質所特有的,而為氨基酸所沒有的一種顏色反應。一般分子中含有兩個氨基甲酪基(即肽鍵:

-co-nh-)的化合物與鹼性   銅溶液作用,就會形成紫色或藍紫色絡合物。   注:除-co-nh-有此反應外,(-conh2-)、(-ch2-)、(-nh2-)、(-cs-cs-nh2)等基團亦有此反應。

尿素裡面是肽鍵嗎?可以和雙縮脲反應?

10樓:

1 什麼是雙縮脲?

將尿素加熱到稍高於它的熔點時,則發生雙分子縮合,兩分子尿素脫去一分子氨而生成的化合物稱為雙縮脲(縮二脲,h2n-co-nh-co-nh2)。

2 雙縮脲試劑中含有雙縮脲嗎?

高中生物實驗中需要用到雙縮脲試劑,這種試劑用來檢測生物組織中的蛋白質。雙縮脲試劑是由雙縮脲試劑a和雙縮脲試劑b兩種試劑組成。雙縮脲試劑a是質量濃度為0.

1g/ml的naoh溶液,雙縮脲試劑b是質量濃度為0.01g/ml的cuso4溶液。可見這種試劑中並不含有雙縮脲。

3 為什麼檢測蛋白質的試劑稱為雙縮脲試劑?

雙縮脲與上述試劑作用,即在鹼性溶液中與少量的硫酸銅(cuso4)溶液作用顯紫紅色,其原因是在鹼性溶液中雙縮脲與銅離子結合形成複雜的紫紅色複合物。這個顏色反應叫做雙縮脲反應(縮二脲反應),因此把這種試劑稱為雙縮脲試劑。

4 雙縮脲試劑能用於檢測氨基酸、二肽和多肽嗎?

凡分子中含有兩個或兩個以上醯胺鍵(肽鍵)的化合物如多肽、蛋白質等都能與雙縮脲劑發生紫色反應。這是因為蛋白質及多肽的肽鍵與雙縮脲的結構類似,也能與cu2+形成紫紅色絡合物。氨基酸分子中沒有肽鍵,二肽分子中只有一個肽鍵,所以雙縮脲試劑可以用於檢測蛋白質和多肽,但不能用於檢測二肽和氨基酸。

11樓:小林老師**答疑

你好,很高興為你解答,一般情況下,尿素是蛋白質的代謝產物,不含肽鍵。希望對你有幫助。

12樓:小林老師**答疑

回答你好,很高興為你解答,一般情況下,尿素是蛋白質的代謝產物,不含肽鍵。希望對你有幫助。

提問老師,其實我是想問,尿素、雙縮脲、肽鍵有什麼相同點回答這三種是不同的物質呀

提問結構式上有何相同點

回答都有nh2

提問哦~~,ok,謝謝老師

更多4條

雙縮脲反應的雙縮脲反應的定義

13樓:小小芝麻大大夢

在鹼性溶液(naoh)中,雙縮脲(h₂noc-nh-conh₂)能與銅離子(cu₂+)作用,形成紫紅色絡合物(該物質的分子結構式見圖),該反應即雙縮脲反應。

銅溶液作用,就會形成紫色或藍紫色絡合物。

注:除-co-nh-有此反應外,(-conh₂-)、(-ch₂-)、(-nh-)、(-cs-cs-nh₂)等基團亦有此反應。

雙縮脲反應

14樓:

雙縮脲法的原理雙縮脲(nh2-co-nh-co-nh2)在鹼性溶液中可與銅離子產生紫紅色的絡合物,這一反應稱為雙縮脲反應。因為蛋白質中有多個肽鍵,也能與銅離子發生雙縮脲反應,且顏色深淺與蛋白質的含量的關係在一定範圍內符合比爾定律,而與蛋白質的氨基酸組成及分子量無關,所以可用雙縮脲法測定蛋白質的含量。

雙縮脲反應主要涉及肽鍵,因此受蛋白質特異性影響較小。且使用試劑價廉易得,操作簡便,可測定的範圍為1~10mg蛋白質,適於精度要求不太高的蛋白質含量的測定,能測出的蛋白質含量須在約0�5mg以上。雙縮脲法的缺點是靈敏度差、所需樣品量大。

干擾此測定的物質包括在性質上是氨基酸或肽的緩衝液,如tris緩衝液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現紅色沉澱。

雙縮脲試劑為什麼能鑑別蛋白質,為什麼雙縮脲試劑定性檢測蛋白質,而不能 定量檢測蛋白質

當脲被小心地加熱至 150 160 時,可由兩個分子間脫去一個氨分子而生成二縮脲 也叫雙縮脲 雙縮脲與鹼及少量硫酸銅溶液作用生成紫紅色的配合物,此反應稱為雙縮脲反應 由於蛋白質分子中含有肽鍵 co nh 與雙縮脲結構相似,故也能呈現此反應而生成紫紅色配合物,在一定條件下其顏色深淺與蛋白質含量成正比,...

蛋白質與雙縮脲試劑反應後成藍色是什麼原因

反應後是紫色的。所謂雙縮脲是由兩分子尿素經脫氨縮合而成的化合物。該化合物在鹼性溶液 先滴入的naoh 中能與cuso4反應產生紫色絡合物,此反應稱雙縮脲反應。蛋白質分子中含有許多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能起雙縮脲反應,生成紫色絡合物。絡合物是配位化合物的舊稱。配位化合物 coordinatio...

雙縮脲與氨基酸反應還是蛋白質反應

雙縮脲反應是指具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物在鹼性條件下與cu2 反應,生成紅紫色的絡合物.所有的蛋白質均有此顯色反應.雙縮脲試劑就是指能與具有兩個以上肽鍵的化合物發生紅紫色顯色反應的試劑.它是naoh和cuso4兩種溶液.在實驗過程中,先在含蛋白質的溶液中加入等體積的naoh溶液,混合均勻後,再滴...