1樓：
陰性對照的作用就是來判斷實驗是否有汙染的，如果pcr條帶和陰性對照都彌散的話，原因應該是汙染。汙染一般有試劑的汙染，也有可能是環境的汙染。
先說試劑的汙染。你設定的陰性對照所用的每一種試劑都存在被汙染的可能，最實際也最麻煩的方法就是，每次更換一種試劑，重複實驗，從而確定那種試劑發生汙染。你提到的不加引物不彌散，那是必然的結果，及時所有試劑都發生了汙染，不加入引物，擴增也是沒辦法進行的，結果也不會有條帶。
再說環境的汙染。環境的汙染一般就是指氣溶膠的汙染，pcr實驗室多少都會存在這種問題，氣溶膠是比較難以消除的。先假設你所用的試劑都是正常的，你可以選擇兩到三對pcr產物片段較長的引物做試驗（比你此次出問題的實驗所選的要長），進行正常pcr，電泳看結果是如何，如果不出現彌散現象，可初步判斷為氣溶膠汙染。
接著選兩到三對產物片段較短的做實驗（同上），觀察結果，如果同樣出現彌散現象，此時可斷定確實是氣溶膠汙染。
以上所說，屬於理想狀態，首先要排除個人操作失誤，另外具體的情況再具體分析！
個人理解，希望對你有幫助！
2樓：mr_丁小壞
是跑出的條帶很糊麼？如果是的話，按照你說的陰性對照也彌散應該是引物的問題，也有可能是pcr試劑的問題，還有可能是退火溫度的問題。逐個排除吧。
3樓：匿名使用者
引物有無汙染，跑個電泳看看
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