在配製培養基的過程中要注意哪些問題

2021-03-07 07:45:02 字數 5217 閱讀 8311

1樓:無異滄行

根據不同微生物的營養需要配製不同的培養基。

注意各種營養物質的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。

將培養基的 ph 控制在適宜的範圍之內,以利於不同型別微生物的生長繁殖或代謝產物的積累。

要注意各種原料的配比,每種培養基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。

如需要加熱的時候注意時間的把握。

培養基(medium)是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配製的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。

2樓:肇全官傲易

溫度,成分,還有防止細菌感染!

3樓:奉銘奉涵忍

呵呵,高中生物的確涉及到一些,但是不都系統嘛。知識不分年齡的1、培養基配方的選定

不用多說了吧,培養什麼植物,用什麼基礎培養基,用什麼激素,比例什麼的2、培養基的製備記錄

實驗記錄...

3、培養基成分的稱取

當然要乘涼準確了

4、培養基各成份的混合和溶化

各種成分之間,有可能會發生反應,一般是分開溶解的,如果是粗放型實驗,呵呵,另當別論了

5、培養基ph的初步調正

植物生長ph至關重要,一般是5.8~6,同時ph值也關係著培養基的凝固程

度。6、培養基的過濾澄清

7、培養基的分裝、滅菌

這得根據你培養基的成分來定你的滅菌條件,比如容易碳化,你可以降低溫度,提高時間來達到相同的效果

8、培養基的儲存

一般都要放在5-8℃冰箱中儲存

問題一:在配製培養基的操作過程中應注意些什麼問題?為什麼?

4樓:匿名使用者

一、關於培養基配製

1、當然是注意濃度配比不要搞錯

2、很多培養基的加料順序有講究,否則會有沉澱產生3、有些培養基會有不溶物質,分裝前應搖勻

4、不要忘了調節ph值(一般細菌都需要,酵母可能自然ph就行,不過不一定)

5、加熱溶解時儘量不要煮沸,會損失營養物質二、關於微量元素:要看是什麼微量元素

1、如果是抗生素、維生素等不耐熱物質,應該先過濾除菌,再加入滅好菌的培養基中。

2、如果是金屬離子等耐熱眼淚,可以配製成母液,配製培養基時加入適量即可同時滅菌。

三、關於濃度配比:既然需要配製培養基,就說明已經到了實驗室階段1、為了可重複性。總不能今天是這樣,明天又那樣吧。

2、有適合不適合。

3、為了得到最好的培養效果。

在配製培養基的操作過程中應該注意些什麼問題?為什麼

5樓:邂逅

1、培養基配方的選定

同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配製外,一般均應儘量收集有關資料,加以比較核對,再依據自己的使用目的,加以選用,記錄其**。

2、培養基的製備記錄

每次製備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其**,和各種成份的牌號,最終ph值、消毒的溫度和時間製備的日期和製備者等,記錄應複製一份,原記錄儲存備查,複製記錄隨制好的培養基一同存放、以防發生混亂。

3、培養基成分的稱取

培養基的各種成分必須精確稱取並要注意防止錯亂,最好一次完成,不要中斷。可將配方置於傍側,每稱完一種成分即在配方面軍做出記號,並將所需稱取的藥品一次取齊,置於左側,每種稱取完畢後,即移放於右側。完全稱取完畢後,還應進行一次檢查。

4、培養基各成份的混合和溶化

培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。最好使用不鏽鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。

在鍋中溶化時、可先用溫水加熱並隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化後,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然後將兩溶液充分混合。

在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,最後必須加以補足。

5、培養基ph的初步調正

因培養基在加熱消毒過程中、ph會有所變化,培養基各成分完全溶解後,應進行ph的初步調正。例如,牛肉浸液約可降低ph0.2,而腸浸液ph卻會有顯著的升高。

因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的最終ph,保證培養基的質量。ph調整後,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉澱物的析出。

6、培養基的過濾澄清

液體培養基必須絕對澄清,瓊脂培養基也應透明無顯著沉澱,因此 ,須要採用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應摺疊成摺扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。

瓊脂培養基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反覆過濾。

如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55~60°c的培養基放入大的三角燒瓶內,裝入量不得超過燒瓶容量的1/2,每1000ml培養基加入1~2個雞蛋的蛋白,強力振搖3~5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121°c加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。

7、培養基的分裝

培養基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝於試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防溼紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包紮(現試管一般多有用螺旋蓋者)。

分裝時最好能使用半自動或電動的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養基時,分裝量應以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當。分裝容器應預先清洗乾淨並經幹烤消毒,以利於培養基的徹底滅菌。

每批培養基應另外分裝20ml培養基於一小玻璃瓶中,隨該批培養基同時滅菌,以為測定該批培養基最終ph之用。

8、培養基的滅菌

一般培養基可採用121°c高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養基製備方法中,如無特殊規定,即可用此法滅菌。

某些畏熱成分,如糖類,應另行配成20%或更高的濃液,以過濾或間歇滅菌法消毒,以後再用無菌操作技術、定量加於培養基。明膠培養基亦應用較低溫度滅菌。血液、體液和抗生素等則應以無菌操作技術抽取和加入於經冷卻約50°c左右的培養基中。

瓊脂斜面培養基應在滅菌後立即取出,冷至55℃-60℃時,擺置成適當斜面,待其自然凝固。

9、培養基的質量測試

每批培養基製備好以後,應仔細檢查一遍,如發現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養基沾染等、均應挑出棄去。並測定其最終ph。

將全部培養基放入36±1°c恆溫箱培養過夜,如發現有菌生長,即棄去。

用有關的標準菌株接種1~2管或瓶培養基,培養24~48小時,如無菌生長或生長不好。應追查原因並重復接種一次,如結果仍同前,則該批培養基即應棄去,不能使用。

10、培養基的儲存

培養基應存放於冷暗處,最好能放於普通冰箱內。放置時間不宜超過一週,傾注的平板培養基不宜超過3天。每批培養基均必須附有該批培養基製備記錄副頁或明顯標籤。

配製培養基過程中應該注意什麼問題?

6樓:t信念

配置培養基需要:

1、 根據不同微生物的營養需要配製不同的培養基。

2、 注意各種營養物質的濃度及合適配比,保持合適滲透壓 。

3、 將培養基的 ph 控制在適宜的範圍之內,以利於不同型別微生物的生長繁殖或代謝產物的積累。

4、要注意各種原料的配比,每種培養基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。

5、如需要加熱的時候注意時間的把握。

7樓:匿名使用者

在製備培養基時,通常要考慮以下因素:

(1)ph值多數細胞系在ph=7.4下生長得很好。儘管各細胞株之間細胞生長最佳ph值變化很小,但一些正常的成纖維細胞系以ph=7.

4~7.7最 好,轉化細胞以ph=7.0~7.

4更合適。據報道,上皮細胞以ph=5.5合適。

為確定最佳ph值,最好做一個簡單的生長實驗或特殊功能分析。

酚紅常用作指示劑,ph=7.4呈紅色,ph=7.0變橙色,ph=6.

5變黃色,而ph=7.6呈紅色中略帶藍色,ph=7.8呈紫色。

由於對顏色的觀 察有很大的主觀性,因而必須用無菌平衡鹽溶液和同樣濃度的酚紅配一套標準樣,放在與製備培養基相同的瓶子中。

(2)緩衝能力碳酸鹽緩衝系統由於毒性小、成本低、對培養物有營養作用,因此比其他緩衝系統用得多。在生理ph值條件下的緩衝能力差。

(3)滲透壓多數培養細胞對滲透壓有很寬的耐受範圍,一般常用冰點降低或蒸汽壓升高測定。如果自己配培養基,可通過測定滲透壓防止稱量和稀釋等造成的誤 差。

(4)粘度培養基的粘度主要受血清含量的影響,在多數情況下,對細胞生長沒有什麼影響。在攪拌條件下,用羧 甲基纖維素增加培養基的粘度,可減輕細胞損害。這對在低血清濃度或無血清下條件下培養細胞顯得尤為重要。

8樓:陳芙蒼西

根據不同微生物的營養需要配製不同的培養基。

注意各種營養物質的濃度及合適配比,保持合適滲透壓。

將培養基的

ph控制在適宜的範圍之內,以利於不同型別微生物的生長繁殖或代謝產物的積累。

要注意各種原料的配比,每種培養基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。

如需要加熱的時候注意時間的把握。

培養基(medium)是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配製的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。

配製培養基過程中應該注意什麼問題

9樓:t信念

配置培養基需要:

1、 根據不同微生物的營養需要配製不同的培養基。

2、 注意各種營養物質的濃度及合適配比,保持合適滲透壓 。

3、 將培養基的 ph 控制在適宜的範圍之內,以利於不同型別微生物的生長繁殖或代謝產物的積累。

4、要注意各種原料的配比,每種培養基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。

5、如需要加熱的時候注意時間的把握。

10樓:paint溫水寒刀

剛剛複習了這裡,借花獻佛~~

培養基配製應遵循的原則

1、 根據不同微生物的營養需要配製不同的培養基。

2、 注意各種營養物質的濃度及合適配比,保持合適滲透壓 。

3、 將培養基的 ph 控制在適宜的範圍之內,以利於不同型別微生物的生長繁殖或代謝產物的積累。

4、 經濟節約的原則。在所選培養基成分能滿足微生物培養要求的前提下,儘可能選用**低廉,資源豐富的材料作培養基成分。

5、控制氧化還原電位。對厭氧的微生物尤其重要。

6、培養基應無菌。故在培養基配製後應徹底殺死培養基中的雜菌 。

配製培養基過程中應該注意什麼問題

配置培養基需要 1 根據不同微生物的營養需要配製不同的培養基。2 注意各種營養物質的濃度及合適配比,保持合適滲透壓 3 將培養基的 ph 控制在適宜的範圍之內,以利於不同型別微生物的生長繁殖或代謝產物的積累。4 要注意各種原料的配比,每種培養基的配比合適的配比,可以按照老師的要求去做。5 如需要加熱...

問題一 在配製培養基的操作過程中應注意些什麼問題?為什麼

一 關於培養基配製 1 當然是注意濃度配比不要搞錯 2 很多培養基的加料順序有講究,否則會有沉澱產生3 有些培養基會有不溶物質,分裝前應搖勻 4 不要忘了調節ph值 一般細菌都需要,酵母可能自然ph就行,不過不一定 5 加熱溶解時儘量不要煮沸,會損失營養物質二 關於微量元素 要看是什麼微量元素 1 ...

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