急!限制性內切酶在分子生物學技術中的應用

2021-03-05 09:22:17 字數 1507 閱讀 6811

1樓:匿名使用者

pcr dna增殖技術

基因工程

主要是提取目的基因,進行其他工作

2樓:匿名使用者

限制性核酸內切酶(restriction endonuclease):識別並切割特異的雙鏈dna序列的一種內切核酸酶。

[別名] endodeoxyribonuclease

[酶反應] 限制性內切酶能**dna分子在一限定數目的專一部位上。它能識別外源dna並將其降解。

[單位定義] 在指明ph與37℃,在0.05ml反應混合物中,1小時消化1μg的λdna的酶量為1單位。

[性狀] 製品不含非專一的核酸水解酶(由10單位內切酶與1μg λdna,保溫16小時所得的凝膠電泳圖譜的穩定性表示)。

限制性核酸內切酶的命名;一般是以微生物屬名的第一個字母和種名的前兩個字母組成,第四個字母表示菌株(品系)。例如,從bacillus amylolique faciens h中提取的限制性內切酶稱為bam h,在同一品系細菌中得到的識別不同鹼基順序的幾種不同特異性的酶,可以編成不同的號,如hindii、hindiii,hpai、hpaii,mboi、mboi等。

在生物體內有一類酶,它們能將外來的dna切斷,即能夠限制異源dna的侵入並使之失去活力,但對自己的dna卻無損害作用,這樣可以保護細胞原有的遺傳資訊。由於這種切割作用是在dna分子內部進行的,故名限制性內切酶(簡稱限制酶)。限制酶是基因工程中所用的重要切割工具。

科學家已從原核生物中分離出了許多種限制酶,並且已經商品化,在基因工程中廣泛使用。根據限制酶切割的特點,可將它們分為兩大類:一類是切割部位無特異性的;另一類是可特異性地識別核苷酸序列,即只能在一定的dna序列上進行切割。

這種能被特異性識別的切割部位都具有迴文序列,也就是在切割部位,一條鏈正向讀的鹼基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致。在基因工程中使用的多數是後一類酶。限制酶在特定切割部位進行切割時,按照切割的方式,又可以分為錯位切和平切兩種。

錯位切一般是在兩條鏈的不同部位切割,中間相隔幾個核苷酸,切下後的兩端形成一種迴文式的單鏈末端,這個末端能與具有互補鹼基的目的基因的dn**段連結,故稱為黏性末端。這種酶在基因工程中應用最多。另一種是在兩條鏈的特定序列的相同部位切割,形成一個無黏性末端的平口。

3樓:活動星圖

dna限切酶可以識別和切割雙鏈dna分子中特定的序列,並使每條鏈都有一個磷酸二酯鍵斷開。利用這個特性,可將限切酶用於基因工程,切割dna分子以便重組新的dna。

4樓:閆起雲己琴

在生物體內有一類酶,它們能將外來的dna切斷,即能夠限制異源dna的侵入並使之失去活力,但對自己的dna卻無損害作用,這樣可以保護細胞原有的遺傳資訊。由於這種切割作用是在dna分子內部進行的,故名限制性內切酶(簡稱限制酶)。這是自然狀態下的功能,而人類在基因工程中則是利用其可以識別特定的位點,從而產生已知序列的粘性末端,這樣就可以與pcr技術等其他基因工程手段結合,實現對基因的切斷(其實這個酶你就可以理解為基因工程裡的剪刀,當然還有針線(指dna聚合酶類))而且切的位置的幾個核苷酸是特定的有規律的。

限制性核酸內切酶特點具有什麼性,限制性內切酶有幾類?各有什麼特點

限制性核酸內切酶有許多種,但是每一種限制酶都具有專一性,能識別特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位點。限制性內切酶有幾類?各有什麼特點 限制性內切酶主要分成三大類。第一類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在識別點附近的一些核苷酸上切割dna分子中的雙鏈,但是切割的核苷酸順序沒有專一性,是隨機的。這...

核酸內切酶和核酸限制性內切酶有什麼區別

區別 含義不同,作用不同。一 含義不同 核酸內切酶 在核酸水解酶中,為可水解分子鏈內部磷酸二酯鍵生成寡核苷酸的酶,與核酸外切酶相對應。核酸外切酶 核酸外切酶是一類能從多核苷酸鏈的一端開始按序催化水解3 5 磷酸二酯鍵,降解核苷酸的酶。二 作用不同 核酸外切酶的作用 從核酸鏈的一端逐個水解下核苷酸。限...

限制性定語從句和非限制性定語從句的區別

限制性定語從句與先行詞關係密切,對它有限制作用,因此不可以缺少,否則會影響全句的意義。非限制性定語從句又稱描述性定語從句。c非限制性定語從句只與先行詞有一種鬆散的修飾關係,在口語中用停頓的方法表示,在書面語中用逗號隔開,因此從句中的關係代詞不可以省略。非限制性定語從句和限制性定語從句的區別 如下 限...